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目的: 观察前体B细胞克隆增强因子(pre-B cell colony-enhancing factor，PBEF)在重症急性胰腺炎肺损伤（severe acute pancreatitis associated acute lung injury，SAPALI）时的表达变化以及从其促炎作用为切入点，观察PBEF对肺损伤的作用是否依赖其（nicotinamide phosphoribo syltransferase，NAMPT）酶活性，以及对IL-6/STAT3反式信号通路活化的影响，进一步探讨SAPALI的发病机制;通过观察中药清胰汤对PBEF及IL-6/STAT3反式信号通路上关键分子的影响，探讨清胰汤在治疗SAPALI中的作用机理，进一步明确清胰汤的作用靶点，并为临床上中西医结合防治SAPALI提供新线索和新思路。 方法: 实验一:将SD大鼠随机分为假手术组（CON组，n=12）和模型组(SAP组，n=12)。假手术组仅行剖腹术，翻动胰腺。模型组采用5％牛磺胆酸钠(1 ml/kg)经胆胰管逆行注射建立大鼠SAPALI模型。术后24 h检测各组大鼠PaO2、PaCO2、血清淀粉酶的水平。采用H&E染色法观察大鼠胰腺和肺组织的病理变化。采用ELISA方法检测各组大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中PBEF的水平;采用Western blot法和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别从蛋白质和mRNA水平检测肺组织中PBEF的表达强度。采用免疫组织化学(ICH)法观察PBEF在肺组织中的表达。采用Pearson积差相关分析评价血清、BALF和肺组织中PBEF的表达与肺损伤的相关性。 实验二:将SD大鼠随机分为假手术组（CON组，n=12）、模型组（SAP组，n=12)、FK866治疗组（FK866组，n=12）。假手术组仅行剖腹术，翻动胰腺。模型组，FK866治疗组均采用5％牛磺胆酸钠（1 ml/kg）经胆胰管逆行注入建立大鼠重症急性胰腺炎肺损伤模型。FK866治疗组于造模后即刻、6h和12h，对大鼠腹腔注射FK866，剂量为10mg/kg。观察各组大鼠在术后24 h内的存活率，并检测PaO2、PaCO2、血清淀粉酶水（amylase，AMY）平;胰腺肺组织行H&E染色观察病理变化;比色法检测肺组织伊文思蓝(Evans Blue，EB)含量、髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性以及丙二醛(malondialdehyde，MAD)水平并观察肺组织湿干比值（W/D）。采用ELISA方法检测血清和BALF中的PBEF、IL-1β、TNF-α、IL-6、sIL-6R、CXCL1的表达水平;并采用Pearson积差相关分析评价SAPALI大鼠BALF中PBEF与IL-1β、TNF-α、IL-6、sIL-6R的相关性。应用RT-PCR检测肺组织IL-6、CXCL1 mRNA的表达强度，采用Western blot法检测肺组织JAK2、P-JAK2(Y1007+1008)、STAT3、P-STAT3(Y705)蛋白表达情况，并采用免疫荧光法观察P-STAT3(Y705)在肺组织细胞核中的表达情况。 实验三:将SD大鼠随机分为假手术组（CON组，n=12）、模型组(SAP组，n=12)、清胰汤治疗组(QYD组，n=12)和地塞米松治疗组（DEX组，n=12）。假手术组仅行剖腹术，翻动胰腺。模型组、清胰汤和地塞米松治疗组均采用5％牛磺胆酸钠(1 ml/kg)经胆胰管逆行注入建立大鼠重症急性胰腺炎肺损伤模型。地塞米松治疗组于造模后即刻、6h和12h，经大鼠尾静脉注射地塞米松，剂量为10mg/kg。清胰汤治疗组于造模前30min、造模后6h和12h予以大鼠清胰汤经口灌胃治疗，剂量为10ml/kg（生药量:1.91g/ml药液）。观察各组大鼠在术后24 h内的存活率，并检测PaO2、PaCO2、血清AMY;胰腺肺组织行H&E染色观察病理变化;比色法检测肺组织EB含量评估肺微血管通透性，MPO、SOD活性以及MAD水平并观察肺组织W/D。采用ELISA方法检测血清和BALF中的PBEF、IL-1β、TNF-α、IL-6、sIL-6R、CXCL1的表达水平;应用RT-PCR检测肺组织IL-6、CXCL1mRNA的表达强度，采用Western blot法检测肺组织JAK、P-JAK2(Y1007+1008)、STAT3，P-STAT3(Y705)蛋白表达情况，并采用免疫荧光法观察P-STAT3(Y705)在肺组织细胞核中的表达情况。 结果: 1.SAP模型组大鼠动脉PaCO2高于假手术组(P＜0.05)，而PaO2低于假手术组(P＜0.05)。SAP组大鼠的肺组织和胰腺组织病理评分高于假手术组病理评分(P＜0.05)。SAP组大鼠肺组织PBEFmRNA和蛋白表达以及血清和BALF中PBEF的表达较假手术组显著升高(P＜0.05)。SAP组大鼠血清、BALF以及肺组织中PBEF水平与肺损伤病理评分之间的Pearson相关系数分别为0.792、0.683、0.820(P＜0.05)。 2.SAPALI大鼠BALF中PBEF与TNF-α，IL-1β，IL-6，sIL-6R之间的Pearson相关系数分别为0.582、0.613、0.772、0.690(P＜0.05)。使用抑制剂FK866干预后，与SAP模型组大鼠相比，大鼠的生存率明显提高(P＜0.05)。且在抑制了PBEF的细胞内NAMPT酶活性后，大鼠BALF中TNF-α，IL-1β，IL-6和CXCL1的水平较SAP模型组大鼠下降(P＜0.05)。同时，大鼠肺组织W/D和EB含量下降(P＜0.05)。FK866不仅可以降低大鼠肺组织MPO活性(P＜0.05)和MDA含量(P＜0.05)，且可以提高肺组织内SOD的活性(P＜0.05)。此外，抑制了PBEF酶活性后，血清和BALF中IL-6及其可溶性受体sIL-6R的表达也较SAP组大鼠下调(P＜0.05)。FK866对IL-6/STAT3反式信号通路上关键分子的表达有显著影响。与SAP组大鼠相比，FK866可下调P-JAK2(Y1007+1008)与P-STAT3(Y705)的表达(P＜0.05)，使P-STAT3转位至细胞核中的数量下降，并下调了CXCL1 mRNA水平，但不影响总的JAK2和STAT3的表达(P＞0.05)。 3.采用清胰汤和地塞米松干预后，与SAP模型组大鼠相比，大鼠的生存率明显提高(P＜0.05)，虽两种药物在改善生存率上相比无差异，但清胰汤在提高SAP大鼠生存率的效果上较地塞米松相比有更好的趋势。胰腺组织和肺组织的病理评分与模型组大鼠相比，显著降低(P＜0.05)，而清胰汤和地塞米松组相比未见统计学差异(P＞0.05)。与模型组大鼠相比，清胰汤和地塞米松两组大鼠PaCO2和血清AMY活性降低(P＜0.01)，PaO2水平增加(P＜0.001)。而清胰汤和地塞米松组相比，两组在改善PaO2和PaCO2以及血清AMY活性上无统计学差异(P＞0.05)。清胰汤和地塞米松干预后，大鼠肺组织W/D有所下降(P＜0.01)，肺组织EB含量降低，差异有统计学意义(P＜0.01)。与模型组大鼠相比，经两组药物干预后，大鼠肺组织的MPO活性降低，差异具有显著性(P＜0.01)。但地塞米松抑制MPO活性的效力优于清胰汤(P＜0.05)。而两组大鼠肺组织的MDA含量均低于模型组大鼠，差异具有显著性（分别为P＜0.01，P＜0.001）。而地塞米松组和清胰汤组大鼠MDA的含量相比无差异(P＞0.05)。且两组大鼠肺组织SOD活力高于模型组大鼠，差异具有显著性(P＜0.05，P＜0.01)。然而地塞组大鼠肺组织SOD活性高于清胰汤组大鼠(P＜0.05)。与模型组大鼠相比，两组大鼠血清和BALF中IL-6以及sIL-6R的水平下降(P＜0.05)，肺组织中IL-6在mRNA水平的表达在清胰汤和地塞米松干预后也显著下降（分别为P＜0.05和P＜0.01），但清胰汤组大鼠肺组织IL-6 mRNA的表达高于地塞米松组(P＜0.05)。与模型组相比，清胰汤组大鼠肺组织中的P-JAK2和P-STAT3表达有所降低(P＜0.05);P-STAT3转位至胞核的数量大大下降。地塞米松组大鼠肺组织P-JAK2和P-STAT3的表达较模型组相比均下降(P＜0.01)，且P-STAT3转位至胞核的数量亦下降。清胰汤和地塞米松两组药物相比在P-JAK2和P-STAT3的表达上以及影响P-STAT3核转位的程度方面未见统计学差异，且清胰汤和地塞米松两种药物均未影响SAP大鼠肺组织中总的JAK2和STAT3的表达。与模型组相比，地塞米松组大鼠肺组织中的PBEF下降(P＜0.05);清胰汤干预后可显著降低大鼠肺组织PBEF表达(P＜0.01)。 结论: 1.肺组织PBEF在大鼠发生SAPALI时表达上调。 2.在SAPALI的大鼠模型中，PBEF作为细胞外促炎因子调节多种细胞因子的表达水平并与之呈正相关关系，并影响大鼠肺组织抗氧化能力、中性粒细胞浸润、参与肺组织和功能损伤。 3.抑制PBEF的NAMPT酶活性后可改善重症急性胰腺炎大鼠的肺损伤。 4.PBEF可能为IL-6/STAT3反式信号通路上游的影响因素，参与抑制该通路的活化。 5.中药清胰汤和地塞米松可下调重症急性胰腺炎肺损伤大鼠的PBEF表达，从而缓解炎症反应。