目的：　　肝细胞癌(HCC)是由肝细胞产生的恶性肿瘤，是最常见的癌症之一，也是导致癌症死亡的第二大原因。人类白细胞抗原(HLA)在免疫功能上扮演重要的角色，同时也参与了肝癌的发生与发展。另外越来越多研究表明GLB1参与细胞的衰老和癌症的发生。　　本实验在补充和验证rs9272105、rs9275319和rs4678680多态性与HCC易感性关系的研究基础上，对其多态性和生存期之间的关系也进行了深入的研究。同时，我们还纳入了多项临床指标进行综合分析，以探讨这三个位点多态性在肝癌发展和预后中所起的作用。　　方法：　　1.血液样本的采集　　本实验共收集血液样本1109例，健康对照组样本548例，其中男性394例，女性154例;经病理诊断确诊的HCC患者样本561例，其中男性患者459例，女性患者102例。所有血液样本均来自郑州大学第一附属医院。此项研究获得了郑州大学伦理委员会的批准，并且所有受试者均对本研究知情同意。血液样本的收集全过程按照规范化和标准化要求进行。　　2.基因分型　　共选取三个SNP位点进行基因分型，这三个位点分别为rs9272105、rs9275319和rs4678680。按照人血液基因组DNA试剂盒的要求，从收集到的血液样本中提取全基因组DNA，并对提取的DNA进行含量测定。经过引物的设计、DNA目的片段的扩增最终测序得到这三个位点的基因型。　　3.临床指标的测定　　所有血液样本的临床生化指标均由全自动生化分析仪进行检测。　　4.生存期调查患者的纳入　　自2013年2月到2016年5月，于郑州大学第一附属医院就诊的291名经病理诊断确诊为HCC的患者被纳入此次生存期调查研究中。患者临床资料被整理保存。所有纳入本次研究的患者均进行过肝癌切除术或射频消融术根治性治疗，并记录手术时间。　　5.随访　　对纳入生存期调查的HCC患者进行随访。随访方式包括电话随访、家庭随访和门诊随访。此次调查最后一次随访时间为2017年12月30日。术后生存期定义为从肝癌切除术或射频消融术开始到患者因为HCC死亡或最后一次随访时仍存活健在的时间。生存时间单位为日。　　6.统计学方法　　用软件SPSS17.0对各项数据进行统计学分析。临床指标均不符合正态分布，因此采用非参数检验。二分类Logistic回归模型用于分析SNP位点与HCC的相关性。生存期分析采用Kaplan-Meier法，Log-rank检验用于单因素分析，而多因素生存分析和基因多态性与预后的关系用COX比例风险模型来分析。所有分析均采用双侧检验，P＜0.05表明具有统计学意义。　　结果：　　1.HLA、GLB1基因多态性与肝癌易感性及临床指标的关系　　1.1 HLA、GLB1基因多态性对肝癌易感性的影响　　以健康人群作为对照，与位点rs9272105为A/A型的人群相比，A/G型和G/G型显著降低了患HCC的风险（A/G:OR=0.49，95％CI=0.33-0.74，P=6.71*10-4;G/G:OR=0.57，95％CI=0.37-0.87，P=0.009）。与不携带G等位基因的人群相比，携带G等位基因的人群患HCC的风险显著降低(OR=0.52，95％CI=0.36-0.77，P=9.75*10-4);与位点rs9275319中携带G等位基因的人群相比基因型为A/A型人群患HCC的风险显著增加(OR=1.71，95％CI=1.18-2.48，P=0.004)。同时等位基因A在HCC组中所占频率显著高于健康对照组，表明等位基因A增加了患HCC的风险(OR=1.5，95％CI=1.1-2.04，P=0.011);位点rs4678680基因多态性与HCC易感性无关。　　1.2 HLA、GLB1基因多态性对临床指标的影响　　在健康对照组中，与位点rs9272105基因型为A/A的人群相比，G/G型人群凝血酶时间(TT)和A/G型人群总蛋白(TP)的水平显著降低(P＜0.05)，A/G和G/G型人群纤维蛋白原(FIB)含量显著升高(P＜0.05);位点rs9275319基因型为G/A的人群凝血酶原时间(PT)和基因型为G/G型人群的纤维蛋白原(FIB)显著高于A/A型人群(P＜0.05);位点rs4678680基因型为T/T的人群总胆汁酸(TBA)水平显著高于T/G型人群。在HCC组中，位点rs9275319为G/A型人群球蛋白(GLB)水平显著高于A/A型人群(P＜0.05)。　　2.HLA、GLB1基因多态性对HCC患者预后的影响　　2.1 影响HCC患者生存期的单因素和多因素分析　　运用Kaplan-Meier法对291名HCC患者的临床资料进行单因素分析。结果表明ALT、AST、GGT、ALB、TP、TBIL、PT、D-DT、FIB和AFP是HCC患者预后的影响因素(P＜0.05)。将单因素分析结果纳入COX多因素风险回归模型中，得到ALT(HR=1.997，95％CI=1.212-3.291，P=0.007)、GGT(HR=2.235，95％CI=1.366-3.657,P=0.001)、ALB(HR=0.529,95％CI=0.338-0.829,P=0.005)、D-DT(HR=2.046,95％CI=1.277-3.278,P=0.003)和AFP(HR=2.041,95％CI=1.331-3.128，P=0.001)是影响HCC患者预后的独立影响因素。　　2.2 HLA、GLB1基因多态性对HCC患者生存期的影响　　位点rs9272105为A/G型的HCC患者与A/A型的患者相比，死亡风险提高了大约2.4倍（HR=2.37，95％CI=1.29-4.35，P=0.005）。而携带G等位基因的HCC患者与未携带G等位基因的HCC患者相比，死亡风险提高了大约2.1倍(HR=2.11，95％CI=1.17-3.78，P=0.013)。rs9275319和rs4678680位点的基因多态性对HCC患者生存期均无显著影响。但与位点rs9275319中携带G等位基因的HCC患者相比，未携带G等位基因的HCC患者有降低死亡风险的趋势(HR=0.70，95％CI=0.43-1.14，P=0.15)。同时由Kaplan-Meier生存曲线进一步分析显示，rs9275319基因多态性与HCC患者生存期可能存在一定的相关性(PLog-rank=0.071)。　　2.3 HLA基因多态性联合预后风险因素对HCC患者预后的影响　　将多因素分析得到的五种影响HCC患者预后的独立因素与rs9272105、rs9275319不同基因型相组合，评估两者是否存在联合效应。结果表明，在两多态性位点中，携带G等位基因且ALT、GGT、D-DT和AFP为高水平组相对于不携带G等位基因且ALT、GGT、D-DT和AFP为低水平组死亡风险大幅度提升。携带G等位基因且ALB为低水平组相对于不携带G等位基因且ALB为高水平组同样死亡风险大幅度提升。并且随着HCC患者预后危险因素（携带G等位基因、高水平的ALT、GGT、D-DT、AFP或低水平的ALB）的增加，死亡风险呈上升趋势。Kaplan-Meier生存曲线进一步分析显示，随着HCC患者携带危险因素的增多死亡发生显著提前。　　2.4 HLA基因多态性对各个亚组HCC患者预后的影响　　通过对年龄、性别、吸烟史、饮酒史和血清AFP水平的分层分析发现，在年龄小于55岁的患者和血清AFP水平小于400ng/ml的患者中，位点rs9272105携带G等位基因的患者相对于A/A型基因的患者死亡风险增加的更为显著;在年龄大于55岁的患者、无饮酒习惯的患者以及血清AFP水平小于400ng/ml的患者中位点rs9275319为A/A型的患者相对于携带G等位基因的患者死亡风险降低的更为显著。　　2.5 预后风险基因积累效应对HCC患者生存期的影响　　将rs9272105和rs9275319两个多态性位点对HCC患者预后进行联合分析，探讨两位点风险等位基因G是否对HCC患者预后存在积累效应。结果证明，随着风险等位基因数量的增加，死亡风险的趋势也明显增加(Ptrend=0.004)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示，随着HCC患者风险等位基因数量的增加，患者中位生存期显著缩短(PLog-rank=0.016)。　　结论：　　1.rs9272105和rs9275319基因多态性与HCC易感性相关，携带G等位基因降低了患HCC的风险。rs4678680基因多态性和HCC易感性无关。　　2.ALT、GGT、ALB、D-DT和AFP是影响HCC患者预后的独立影响因素。　　3.在位点rs9272105和rs9275319中携带G等位基因增加了HCC患者的死亡风险。rs4678680基因多态性与HCC生存期无关。　　4.rs9272105和rs9275319基因多态性与五种预后独立影响因素联合，对HCC患者生存期有显著影响，随着HCC患者预后危险因素的增加，死亡风险呈上升趋势。　　5.在rs9272105和rs9275319两个多态性位点中，随着风险等位基因数量的增加，死亡风险也显著增加。