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目的:研究山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对血栓形成、血小板功能的影响及其作用机制。
方法:建立动-静脉旁路血栓形成大鼠模型,研究CIG对体内血栓形成的影响。采用肾上腺素皮下注射加冰水刺激法建立血瘀大鼠模型。应用比浊法测定家兔(体外实验)及血瘀大鼠模型(体内实验)的血小板聚集率,观察CIG对血小板聚集的影响。在体外实验中,采用FLUO-3/AM钙离子荧光指示剂,测定家兔血小板胞浆钙离子浓度；应用酶标法测定家兔血小板环磷酸腺苷(cAMP)含量。在体内实验中,采用酶标法测定大鼠血小板血栓素B2(TXB2)水平、以及血浆的血管性血友病因子(vWF)、颗粒膜蛋白140(GMP-140)和膜糖蛋白Ⅱ b-Ⅲa(GPⅡ b-Ⅲa)含量。
结果:
(1)在大鼠动-静脉旁路血栓实验中,CIG(180mg/kg)灌胃给药7 d能够显著减轻血栓的湿重和干重,具有抗体内血栓形成的作用。
(2)在体外实验中,CIG(0.75mg/ml、1.5mg/ml、3mg/ml)能明显抑制ADP、AA诱导的家兔血小板聚集；CIG更大剂量(6mg/ml、12mg/ml)能显著抑制PAF诱导的血小板聚集。
(3)CIG(180mg/kg)灌胃给药在血瘀大鼠的体内实验中可以显著抑制ADP诱导的血小板聚集。
(4)在体外实验中,CIG各剂量组对静息状态下的家兔血小板内钙离子浓度无影响,但CIG(3mg/ml、6mg/ml)能显著抑制ADP引起的血小板内钙离子浓度的升高,并且CIG(3mg/ml、6mg/ml)明显升高ADP引起的家兔血小板cAMP的降低。
(5)CIG(180mg/ml)灌胃给药显著降低ADP诱导的大鼠血小板TXB2含量。
(6)CIG(180mg/ml)灌胃给药显著降低血瘀大鼠血浆vWF、GMP-140和GPⅡb-Ⅲa含量。
结论:CIG具有抗血栓和抗血小板聚集作用,其作用机制可能与降低血小板内钙离子浓度和TXB2含量、升高cAMP含量有关,并且与降低血浆vWF、GMP-140和GPⅡ b-Ⅲa含量有关。