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背景胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,在我国其发病率居各类肿瘤的首位,其中胃腺癌为来源于上皮细胞的恶性肿瘤,占胃恶性肿瘤的95%。早期胃癌并无特异性症状,难以发现；中晚期胃癌容易发生侵袭转移,导致胃癌患者失去手术甚至放化疗的机会,是胃癌的常见死亡原因。研究表明,上皮间质转化(epithelial-mesench ymal transtions, EMT)是肿瘤细胞发生侵袭转移重要机制之一,癌细胞通过EMT而获得了间质细胞样表型和侵袭能力,从而穿透基底膜进入相邻组织,实现迁移与浸润。研究肿瘤细胞的EMT发生机制对于干预恶性肿瘤的侵袭与转移具有重要意义。大量细胞遗传学和临床研究发现胃癌中EMT相关基因存在高表达,说明胃癌侵袭转移中存在EMT现象；因此从EMT现象入手研究胃癌中EMT发生机制有益于阐明胃癌侵袭转移机制。EMT是多因素参与的复杂过程,目前其发生确切机制未明。近年来有学者从肿瘤微环境入手,提出内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)可诱导并调节肿瘤细胞EMT的发生。内质网应激是指各种内外因素导致内质网内未折叠和错误折叠蛋白在内质网中聚集,干扰内质网功能,激活未折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)。研究表明,大多数肿瘤细胞包括胃癌细胞中普遍存在内质网应激现象,ERS标致性蛋白GRP78在多数肿瘤细胞中表达增高明显并与肿瘤恶性程度及侵袭性相关。最近有研究显示,内质网应激可诱导包括乳腺癌细胞、肝癌细胞等多种肿痛细胞发生EMT；但胃癌细胞中未见具体研究报道。据此,我们推测“胃癌细胞中激活的ERS,可参与诱导胃癌细胞发生EMT,促进胃癌的侵袭与转移”。本研究旨在阐明胃癌细胞中激活的ERS能否参与诱导其发生EMT,并促进该肿瘤细胞的侵袭与转移,为明确胃癌侵袭转移机制提供理论依据。目的探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)能否诱导胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transtions, EMT),进而促进该肿瘤细胞的侵袭转移。方法1.采用无胎牛血清的RPMI1640培养基培养胃癌SGC-7901细胞0、3、6、12、24h, RT-PCR、Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达；取GRP78高表达时间点诱导,采用RT-PCR、Western blot同时检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)及N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达；细胞划痕试验观察饥饿处理SGC-7901细胞的侵袭转移能力。2.以浓度为10μg/ml的衣霉素(tunicamycin)处理胃癌SGC-7901细胞0、6、12、24h, RT-PCR、Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达；取GRP78高表达时间点诱导,RT-PCR、Western blot法同时检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)及N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达；镜下观察细胞形态学变化。细胞划痕试验观察衣霉素诱导SGC-7901细胞的侵袭能力。结果1.无胎牛血清的RPMI1640培养基培养6h的SGC-7901细胞GRP78mRNA及蛋白高表达(P<0.05)；在GRP78高表达的同时,饥饿组E-cadherin的mRNA及蛋白表达较对照组下降(P<0.05)而N-cadherin mRNA及蛋白表达高于对照组(P<0.05)。划痕试验可见饥饿组细胞较对照组划痕宽度愈合速度快。2.10μg/ml的衣霉素处理胃癌SGC-7901细胞12h后,细胞形态逐渐类似于长梭形并生出伪足。E-cadherin的mRNA及蛋白表达下降(P<0.05),GRP78、 N-cadherin的mRNA及蛋白表达同时升高(P<0.05)。胃癌SGC-7901细胞侵袭转移能力增强。结论1.血清饥饿诱导的内质网应激可参与介导胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化,进而促进胃癌侵袭转移。2.衣霉素诱导的内质网应激可参与介导胃癌SGC-7901细胞发生EMT,进而促进该肿瘤细胞的侵袭转移。