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显色培养基在食品、临床等领域的微生物检测的应用上,既保证了检测结果的准确性,又可以大大减少检测时间。本文以2,4-二氯苯甲酸和邻氨基苯甲酸甲酯为起始原料,合成了一系列3-吲哚酯和3-吲哚葡萄糖苷类化合物,并对其进行了结构表征。探索和优化了目标化合物的合成工艺条件,并将其作为显示剂进行微生物检测的应用进行探索。1)对3-吲哚酯类化合物的反应时间、反应温度、投料比、催化剂用量等进行考察,得出结论:(1)采用I2和30%的H2O2对邻氨基苯甲酸进行碘代,5-碘-2-羧基甲基氨基苯甲酸的适宜条件:氯乙酸钠为5-碘-2-氨基苯甲酸的1.2倍当量,反应温度75℃,反应时间为12 h,pH为8。(2)N-乙酰基-6-氯吲哚-3-乙酸酯的合成的适宜条件:每克2-羧基甲基氨基-4-氯苯甲酸使用16 mL的无水乙酸酐(2-羧基甲基氨基-4-氯苯甲酸:无水乙酸酐=1:38.8),无水乙酸钠是2-羧基甲基氨基-4-氯苯甲酸的4倍当量,反应温度为120℃,反应时间为2 h。(3)6-氯-3-吲哚辛酯的合成的适宜条件:氢氧化钠为N-乙酰基-6-氯吲哚-3-乙酸酯的12倍当量,脱乙酰基保护温度120℃,反应2 h,辛酰氯为N-乙酰基-6-氯吲哚-3-乙酸酯的5倍当量,反应温度0℃,反应2 h。目标产物经过了1H NMR和13C NMR进行表征。对3-吲哚葡萄糖苷类化合物的合成进行了探究,得出以下结论:(1)(l-乙酰基-6-氯吲哚-3-基)-2,3,4,6-四乙酰基-β-D-葡萄糖苷合成的适宜条件,溴代四乙酰葡萄糖为N-乙酰基-6-氯-3-吲哚酮的2倍当量,氢氧化钾为N-乙酰基-6-氯-3-吲哚酮的2倍当量,反应时间4 h,反应温度为室温。(2)合成6-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷的适宜条件:选用甲醇钠对保护基团乙酰基脱保护,甲醇钠的量为(l-乙酰基-6-氯吲哚-3-基)-2,3,4,6-四乙酰基-β-D-葡萄糖苷的1倍当量,反应时间2 h,反应温度室温。目标产物通过了1H NMR和13C NMR进行表征。2)将3-吲哚脂类化合物作为显示指示剂在沙门氏菌检测中的应用,筛选出检测效果良好的显色培养基方案:沙门氏菌显色底物0.5 g/L,X-Gal 0.6 g/L,分别用2 mL二甲基亚砜和2 mL N,N-二甲基甲酰胺溶解,加入去氧胆酸钠1 g/L,抗生素0.004 g/L。自制的沙门氏菌显色培养基可以根据菌落的颜色来判断沙门氏菌,菌落的颜色醒目,易区分。同时具有良好的特异性,能够将易造成假阳性的铜绿假单胞菌排除,对大部分的革兰氏阳性菌有很好的抑制效果。加入的沙门氏菌显色底物和X-Gal显色底物能够将沙门氏菌和大肠杆菌区分。自制的6-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷显色效果优异。