本文首先综述了黄酮类物质的分类、生物活性、各种理化性质和显色反应等,并对国内外文献中黄酮类物质的提取、纯化、分离和分析过程的研究进展进行了概述和比较。 实验中,在浸取方面,主要比较了水、乙醇溶液和正丁醇/水两相系统这三种浸取溶剂在不同浸取条件下(温度、浸取时间等)得到的总黄酮得率的大小。总黄酮含量分析采用酸性条件下氯化铝显色的可见光分光光度法。 乙醇溶液是目前国内普遍使用的浸取剂,而正丁醇/水两相系统则可以看成是一个浸取-萃取耦合的体系,机理可能是正丁醇在进入水相时,被分离成无数的小液滴,作为乳化液分散在水相料液中,形成水包油体系,同样地,水相进入正丁醇相中也形成了油包水体系,这些油包水和水包油微粒是浸取的体积单元,溶质透过油膜向膜内相扩散完成传递过程,最后乳化相破乳得到产品,由实验数据可知,两相浸取中,总黄酮的浸取得率与常用的乙醇溶液相比稍小,却实现了浸取和萃取过程,达到了粗黄酮类物质的初步分离,是一种值得研究的萃取系统。而水作为浸取剂,达浸取平衡时浸取得率约为乙醇溶液的80%,相比较之下,水是一种更为洁净和廉价的浸取剂,而且叶绿素不溶于水,在后续处理中免去了去除叶绿素的麻烦,也是其的一大优点。 粗提物醇沉后采用液液萃取方法,对水浸取的粗提物进行了初步纯化。主要是使用极性由小至大的各种有机溶剂连续抽提(石油醚—乙酸乙酯—正丁醇—水的四部位法),从而将亲脂性的成分和亲油性的成分分开。然后详细地对竹叶粗提物液液萃取纯化后的成分用硅胶板进行了展开剂的选择,发现了乙酸乙酯:丙酮:水:乙酸系统对该混合物具有较好的展开性能,再用硅胶柱层析对液液萃取纯化后的粗提物进行了分离。