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目的:通过建立犬急性肺栓塞动物模型,观测犬急性肺栓塞前后肺组织微循环灌流量及血液流变学变化,并应用乌司他丁对急性肺栓塞后的动物模型进行干预,观测乌司他丁对肺栓塞后肺组织微循环血液灌流量及血液流变学的影响,探讨乌司他丁对急性肺栓塞后肺微循环和血液流变学产生影响的机理。
方法:随机选取成年健康家犬30只,雌雄不限。将家犬随机分成三组,即空白对照组、单纯肺动脉栓塞组、乌司他丁治疗组,每组随机取各10只。将受试各组家犬全麻,气管插管,摆好体位、固定,以人工气囊辅助呼吸,同时低流量吸氧,实验过程中用丙泊酚维持镇静,以维库溴铵维持肌松。将空白对照组、单纯肺动脉栓塞组及应用乌司他丁组受试前动物双侧股静脉区备皮、左颈部备皮,双侧股静脉置留置针,备给药、抽血用;由左颈内静脉置入漂浮导管,经上腔静脉、右心房、右心室到达左肺动脉干;单纯肺动脉栓塞组和应用乌司他丁组向导管内连续注入多段长约1cm10号慕丝线线段,直至在肺动脉造影下左肺动脉血流完全阻断,形成左肺动脉栓塞,建立急性肺栓塞模型完毕。建立观测窗,将三组受试动物左胸备皮,经左胸壁将皮肤、皮下、肌层逐层解剖切开,制成方形肌皮瓣,于肋骨床切除一段4cm第五肋,沿方形观测窗周围将壁层胸膜连续缝合于肺组织表面后,打开肺表面的壁层胸膜,做成4×4cm方形带肌皮瓣的观测窗口,这样不会造成气胸,不需观测时将肌皮瓣覆盖,维持接近正常生理状态的观察环境。应用乌司他丁组于肺栓塞即刻经股静脉注射乌司他丁,空白对照组和单纯肺动脉栓塞组同时相经股静脉注射等量生理盐水。取肺动脉栓塞前0.5h及栓塞后10min、0.5h、1h、2h、3h、5h七个时相,分别为T0、T1、T2、T3、T4、T5、T6代表。观测记录不同时相受试肺表面微循环血液灌流值、血液流变学指标。对所有计量资料均以X±S表示,采用SPSS13.0软件包进行数据处理,统计学分析采用完全随机设计的两样本均数比较的t检验。
结果:
1肺栓塞模型建立前T0时相的观测:单纯肺动脉栓塞组、应用乌司他丁组和空白对照组家犬肺脏肉眼观呈鲜红色、有光泽、弹性好,肺表面微循环灌流图像亮度较高,微循环灌流值(V)三组间比较无显著性差异(P>0.05)。
2肺栓塞模型建立后各个时相的观测:单纯肺动脉栓塞组肺脏外观在肺动脉栓塞后迅速变浅、发暗,之后颜色逐渐加深直至呈暗红色。灌流值在肺动脉栓塞后迅速减低,与栓塞前比较及与实验对照组比较:P<0.05,具有统计学意义,1h后灌流量继续减少,2h后灌流量逐渐出现增加趋势,激光多普勒扫描所获得的图像从肺栓塞后10min到其后5h,所采集到不同时相图像的色彩浓度、亮度大体呈迅速加深变暗,后逐渐好转。应用乌司他丁组肺脏外观在肺动脉栓塞后迅速变浅、变暗,之后颜色逐渐加深直至呈暗红色,激光多普勒扫描所获得的图像从肺栓塞后10min到其后5h,所采集到图像的色彩浓度和亮度大体呈迅速加深变暗然后逐渐好转,但要优于单纯栓塞组。
3肺栓塞模型建立后血液流变学改变
犬单纯肺栓塞后各切变率全血粘度和还原粘度均明显升高,应用乌司他丁组这两项值也升高,与单纯栓塞组相比无明显差异,P>0.05;两组栓塞前后血浆粘度和红细胞比积均无明显变化,P>0.05;两组红细胞刚性指数及聚集指数有升高趋势,两组相比无显著差异。
结论:通过本实验建立科学、合理的家犬急性肺栓塞动物实验模型,观测到犬肺组织在栓塞后血液灌注量显著下降,血流动力学也相应出现了粘稠度增高,红细胞刚性指数和聚集指数略有增高。乌司他丁通过抑制急性肺损伤炎症细胞的聚集和激活,抑制急性肺损伤炎症介质和细胞因子的释放,减轻了各种因素对肺的损伤,减轻了肺水肿发生;并通过抑制前述各种因素对肺小动脉的收缩作用,从而改善了肺脏微循环灌注,但对栓塞后血流动力学指标未产生显著作用。