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目的: 1.探讨重组HMGB1蛋白预适应对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。 2.探讨重组HMGB1蛋白预适应介导脑保护作用的分子机制。 方法: Wistar雄性大鼠随机分为三组:假手术组、溶媒预处理组、重组HMGB1(rHMGB1)预处理组。大鼠侧脑室注射溶媒生理盐水或不同剂量rHMGB1(2，4，8μg/kg)预处理1天或3天后，采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型，于缺血2小时再灌注22小时后行改良的神经缺损评分量表(mNSS)评价神经功能、TTC染色观察梗死体积变化、伊文思蓝渗漏实验检测血脑屏障通透性、TUNEL法检测细胞凋亡。在机制研究中，应用western blot检测脑梗组织TLRs信号通路的负性调控因子白介素1受体相关激酶M(IRAK-M)及伴随的磷酸化IRAK-1(pThr209; p-IRAK-1)的表达。应用体内免疫荧光双标法、体外rHMGB1刺激BV2细胞24小时后qPCR法鉴别IRAK-M与小胶质细胞共定位情况，以及应用TLR4特异性抑制剂TAK-242研究上游信号通路TLR4受体在rHMGB1预处理诱导脑保护中的作用。 结果: 1.在剂量依赖性实验中，rHMGB1(4，8μg/kg)预处理1天可以改善大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经功能缺损，减少梗死体积，但2μg/kg的剂量没有保护作用;在预处理时间窗研究中，rHMGB1(4μg/kg)预处理1天具有脑保护作用，而预处理3天不能诱导脑缺血耐受。 2.rHMGB1(8μg/kg)预处理1天可以减少大鼠脑梗死缺血半暗带区的细胞凋亡并减轻血脑屏障的通透性。 3.Western检测发现单纯侧脑室注射rHMGB124小时和脑缺血再灌注损伤均可上调IRAK-M表达，但是rHMGB1预处理的脑梗组织里IRAK-M表达较前两种更高并且伴随磷酸化IRAK-1(pThr209)减少。TAK-242完全废除了rHMGB1预处理诱导的脑保护作用、IRAK-M的表达增加。此外，体内实验免疫荧光双标法显示IRAK-M和小胶质细胞标记物Iba-1高度共定位，并提示是胞浆内表达;体外BV2细胞实验进一步验证了rHMGB1可以剂量依赖性诱导小胶质细胞IRAK-M mRNA表达。 结论: 1.rHMGB1预处理诱导大鼠脑缺血耐受。 2.该脑保护作用可能与TLR4介导的小胶质细胞表达IRAK-M升高有关。