安徽菊花炭疽病病原菌的分离鉴定、致病性测定及防治药剂筛选

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菊花(Dendranthema morifolium(Ramat.)Tzvel.)是我国十大名花之一,并且是世界四大切花之一,有着巨大的商业价值。由炭疽菌属真菌引起的炭疽病导致菊花品质与产量下降。本次试验对菊花炭疽病病原菌进行分离、鉴定以及生物学特性研究,探究不同种炭疽病菌对菊花的致病力,在此基础上,还探讨了6种杀菌剂对菊花炭疽病菌菌丝生长的抑制作用。主要研究结果如下:1.菊花炭疽病病原菌的分离与鉴定采用组织分离法从安徽省黄山、滁州及亳州采集的菊花炭疽病病株上分离得到50株菊花炭疽病菌。选取19株代表性菌株,用ITS、ACT、GAPDH、TUB及CHS-15个基因位点基因序列,采用最大似然法(ML)构建系统发育树。结果表明,19株菌株包括10株普氏炭疽菌Colletotrichum plurivorum、5株果生炭疽菌Colletotrichum fructicola、3株Colletotrichum truncatum与、1株长直孢炭疽菌Colletotrichum gigasporum;其C.plurivorum占分离物的49%。2.不同炭疽病菌对菊花的致病力依据柯赫氏法则,将分离纯化的炭疽病菌回接到健康的菊花叶片和花,结果显示:在叶片上,C.plurivorum菌株282、285表现出较强的致病力;C.fructicola菌株451、192致病力较弱,侵染速度较慢;C.truncatum菌株419致病力较弱;C.gigasporum菌株410侵染初期不引起菊花叶片发病,到后期病斑扩展迅速,叶片迅速变褐。在花上,C.plurivorum菌株282、285表现出较强的致病力,侵染后变褐色;C.fructicola菌株451、192致病力较强,侵染速度快;C.truncatum 419表现出较强致病力,呈深褐色;C.gigasporum 410对花朵表现出较强致病力,花瓣呈深褐色,幼嫩的花朵完全变黑。在植株活体上,C.plurivorum 282和285与C.truncatum 419接种菊花幼苗4 d后开始发病,主要表现为顶芽发黑卷曲,幼叶产生黑色病斑,叶柄变褐,茎秆产生褐色点状病斑,植株发黄、萎蔫。菌株回接后的发病症状与病害样本症状相似。3.菊花炭疽病菌生物学特性研究本试验测定了培养基、光照、氮源、碳源等因子对不同菌株生长速率以及产孢量等生物学特性的影响。不同培养基试验结果表明:6株菌株在CM培养基上生长较好,其中4株菌株产孢量最高是在OA培养基上,另外2株菌株产孢量最高是在PDA培养基上。光照试验结果显示:其中4株菌株在全光照条件下生长较好,产孢量最高;另外2株菌株在光暗交替条件下生长较好,产孢量最高。氮、碳源试验结果表明,在供试的碳源中,最佳碳源为葡萄糖,在供试的氮源中,最佳氮源为蛋白胨。4.菊花炭疽菌有效药剂筛选使用菌丝生长速率法测定了氟啶胺、吡唑醚菌酯、戊唑醇、氯氟醚菌唑、吡噻菌胺、种菌唑和吡噻菌胺6种杀菌剂对不同菌株的抑制作用。结果表明:氟啶胺和种菌唑对6个菌株的菌丝生长抑制作用相对较强,同时发现,戊唑醇和氯氟醚菌唑除了对菌株419无抑制作用外,对其他菌株EC50分别在0.2189-10.057μg/m L和0.9598-4.2968μg/mL之间。
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