论文部分内容阅读
目的通过用强力霉素、阿霉素单药及两药联合用药组作用于胃癌BGC823细胞，观察三组药物对胃癌BGC823细胞凋亡的影响，分析诱导肿瘤细胞凋亡过程中对Bcl-2、Bax、Caspase-3、 Notch-1蛋白表达的情况，并对其机制进行初步探讨，以期为临床肿瘤化疗提供高效低毒的治疗方案。方法通过对胃癌BGC823细胞培养及干预，分别以终浓度为5、10、15、20、25ug/ml的强力霉素；2.0、2.5、3.0、3.5、4.0ug/ml的阿霉素；5/2.0、5/2.5、5/3.0、5/3.5、5/4.0ug/ml的联合用药组作用于人胃癌细胞BGC823，用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测各组药物对胃癌细胞的抑制率。取小剂量的强力霉素与高浓度的阿霉素及联合用药组并分为4组：A：空白对照组；B：5ug/ml的强力霉素组；C：4.0ug/ml的阿霉素组；5/4.0ug/ml的联合用药组。采用瑞氏姬母萨染色液染色，显微镜下观察细胞形态学变化；流式细胞法检测肿瘤细胞凋亡率的影响；Westernblot法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、 Notch-1蛋白表达的变化。结果1、用强力霉素、阿霉素及联合用药组分别作用于BGC823细胞24h、48h及72h，MTT结果显示：各组药物对BGC823细胞的增殖均有抑制作用，且呈剂量-时间依赖性，即随着各组药物浓度的增大和作用时间的延长，对胃癌细胞BGC823的增殖抑制作用越明显。2、采用瑞姬氏染色液进行染色，显微镜下观察细胞形态学变化，对照组胃癌细胞BGC823呈多角形或卵圆形，胞浆透亮，单层贴壁生长，经各药物处理后，生存细胞数量及胞浆透明度明显下降，胞膜完整但出现发泡现象。3、流式细胞仪检测结果显示,与对照组相比，强力霉素和阿霉素作用于BGC823细胞后，起到了明显诱导细胞凋亡的作用。当强力霉素与的阿霉素联合使用后，显著增强了阿霉素的诱导细胞凋亡作用。4、Western结果进行计算机图象分析，Western Blot检测结果显示，与对照组比较，强力霉素和阿霉素单药均显示Bax增加而Bcl-2减少，联合用药组Bax增加和Bcl-2减少更为明显。与对照组比较，强力霉素和阿霉素单药组显示Notch1、caspase-3表达增加，联合用药组中Notch1、caspase-3蛋白的表达显著增加。结论1、强力霉素与阿霉素联合用药效果优于强力霉素和阿霉素单独用药组。2、与阿霉素单药组相比，联合用药可促进胃癌细胞BGC823的凋亡，其作用可能与上调Notch-1的表达，活化caspase-3，激活Bax和抑制Bcl-2有关。3、强力霉素作为凋亡诱导剂与化疗药物联合应用可抑制肿瘤细胞的凋亡。