玉米BK2L3基因过表达载体的构建及在番茄中的遗传转化

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fgh000000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞壁是植物细胞结构的重要组成成份,具有稳定细胞形态、减少机械损伤等功能。纤维素作为植物细胞壁的主要成分,在细胞壁生物合成途径中发挥重要作用。COBRA基因家族因参与细胞壁合成,探究其家族成员对果实发育及成熟的作用富有意义。有研究指出,番茄SlCOBRA-Like基因在果实发育早期高度表达且表达量随成熟度增加而降低。同时,该基因转入番茄中会产生同源共抑制现象。因此对玉米BK2L3基因进行初步研究,以期以基因工程手段延长番茄果实货架期,同时消除同源共抑制现象。  玉米BK2L3基因是COBRA基因家族的成员之一。本研究利用RT-PCR技术从玉米cDNA中扩增出玉米BK2L3基因全长,导入启动子为果实特异表达的TFM7植物表达载体pBI121上,构建玉米BK2L3基因果实特异表达的过量表达载体后,通过农杆菌介导的方式转入野生型番茄中,经阳性鉴定,获得BK2L3转基因植株。  本研究分别以野生型番茄和玉米BK2L3转基因植株果实为研究对象,进行初步分析。通过分析玉米BK2L3在果实中的表达情况,观察绿熟期果实果皮细胞壁结构,测定红熟期果实的硬度、货架期和果皮纤维素含量,探究玉米BK2L3基因的功能。半定量RT-PCR分析结果表明:玉米BK2L3基因在转基因番茄植株中有较高表达,在野生型番茄植株中没有表达。转基因番茄果实的硬度、果皮纤维素含量明显高于野生型番茄。显微观察石蜡切片显示:转基因番茄果皮厚度与野生型相比,明显增厚,细胞大小均匀。而且,转基因番茄果实在贮藏期间失水率降低,有效延长果实货架期。因此,BK2L3基因的过量表达与细胞壁代谢和货架期有关,有利于改良番茄果实的品质。同时,玉米BK2L3基因以外源基因方式转入番茄可有效避免同源共抑制现象,促进基因的高效稳定表达,减少株系差异,为反向遗传学的研究进一步提供便利。
其他文献
目的:探讨糖皮质激素联合支气管扩张剂对哮喘合并小气道损伤患儿的临床效果。方法:抽取2016年1月至2019年1月开封市儿童医院收治的哮喘患儿108例,采用随机数字表法分为观察组
一、班会主题的确定  “阳春布德泽,万物生光辉。”每到春天,我们感受着明媚的阳光,暖暖的春风,青青的嫩芽……大自然处处洋溢着春的气息。走近春天,同学们渴望拥抱大自然的心情就再也无法掩饰了:  “老师,今年我们去哪儿春游?”  “老师,带我们到黄河小浪底风景区吧?”  “老师,听说白云山风景区离我们很近,可惜我们还没看过呢!”  …… ……  课余饭后,耳闻同学们的议论,我分明听到了同学们对大自然的
目的:探讨脾多肽注射液联合R-CHOP方案治疗弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的近中期疗效。方法:抽取2014年1月至2018年1月晋城市人民医院收治的DLBCL患者61例,随机分为两组,对照组30
化疗作为恶性肿瘤的有效治疗手段,能改善患者预后,延长生存期,甚至达到临床治愈的效果。化疗能杀灭肿瘤细胞,也会损害育龄期女性患者卵巢功能。卵母细胞冻存、胚胎冻存、卵巢组织
目的:明确外周血及痰液矮小同源盒基因2(SHOX2)、RAS相关区域家族1A(RASSF1A)基因甲基化检测对肺癌早期诊断的意义。方法:抽取2018年3月至2019年3月郑州市第三人民医院收治的
目的:分析支气管镜肺泡灌洗(BAL)联合无创通气(NIV)对重症肺炎患者血气分析指标及炎症因子水平的影响。方法:抽取2017年5月至2019年5月于鄂尔多斯市中心医院接受治疗的重症肺
随着现代生物技术的发展和国际食品贸易的日益扩大,食物过敏问题日益严重。为了更好的预防和控制食物过敏的发生,有关过敏原的评价和相关的机理研究成为急需解决的问题。目前FA
目的:探讨腹主动脉球囊阻断术在凶险性前置胎盘(PPP)患者治疗中的应用效果。方法:抽取2018年6月至2019年2月德州市人民医院收治的62例PPP患者作为研究对象,按患者自身意愿分为
目的:探讨悬吊运动疗法对神经根型颈椎病的治疗效果。方法:抽取2018年7月至2019年10月在菏泽市第三人民医院接受治疗的78例神经根型颈椎病患者,采用随机数字表法将入选者分为
目的:观察改良鼻丘径路额窦开放术治疗慢性额窦炎的效果及对患者嗅觉功能和术后复发的影响。方法:回顾性分析2017年1月至2019年1月武装警察部队河南省总队医院收治的80例慢性