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动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是冠状动脉疾病、脑卒中和周围动脉疾病等血管性疾病的病理基础,其特征是脂质和纤维成分在动脉壁的不断积累,而且在慢性炎症性条件下,可以引发斑块破裂和血栓形成的急性临床事件。对其发病机制的研究已经持续了数十年,内皮功能障碍是动脉粥样硬化的始动因素,平滑肌细胞的增殖和迁移是动脉粥样硬化病理过程中的重要特征。氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)是动脉粥样硬化发生、发展乃至不稳定斑块形成的关键因子,在动脉粥样硬化中的病理作用已得到公认。ox-LDL作为AS的最重要危险因素之一,主要通过损伤内皮细胞、参与泡沫细胞的形成、调控平滑肌细胞的增殖和引起血小板粘附、聚集等多个方面参与AS的发生发展。高血压作为另一个重要危险因素,是一个多层面的与心、脑、肾血管异常和功能障碍相关的疾病。肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system, RAS)在血管炎症和高血压的发展中起着关键性作用。肾素(前体)受体[(pro)renin receptor,(P)RR]作为RAS的新成员之一,近几年在心血管疾病和肾脏疾病中的重要性受到广泛的关注。该受体与肾素和肾素前体结合后,可以通过不依赖于传统的AngⅡ途径,激活细胞内信号转导通路,上调促纤维化基因的表达,最终引起血压升高,心肌纤维化和肾小球硬化等靶器官损害。我们课题组前期实验证实(P)RR存在于人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中,且可以通过引起内皮细胞功能紊乱、炎症因子表达等机制参与动脉粥样硬化的发生和发展。既往有研究证实在血管平滑肌细胞中亦存在(P)RR的表达,以肾素或肾素前体刺激后,可使ERK1/2磷酸化增强,平滑肌细胞过度增殖,与动脉粥样硬化相关。而ox-LDL刺激诱导的平滑肌细胞表型转化、异常增殖和迁移至内膜下,在动脉粥样硬化的发生发展中起重要作用,那么ox-LDL在血管平滑肌细胞中对(P)RR的表达是否存在影响,进而参与动脉粥样硬化的发生和发展呢?目前尚无报道。目的:研究体外培养的人主动脉平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cells,HASMCs)中是否存在(P)RR表达及ox-LDL刺激后对(P)RR mRNA及蛋白表达的影响。方法:1.体外培养HASMCs。2.应用免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)检测HASMCs中是否存在(P)RR的表达。3.以100μg/ml ox-LDL作为干预终浓度,作用于HASMCs不同的时间,分别设培养1,2,4,6,12和24小时亚组,正常对照组用完全培养基培养24小时,用Real-time PCR和western blot方法检测,确定ox-LDL的刺激时间点并观察ox-LDL作用不同时间对(P)RR mRNA和蛋白表达的影响。4.根据时间组结果,筛选ox-LDL刺激(P)RR表达最强的时间点,用不同浓度ox-LDL作用于HASMCs,分别设25,50,100,150,200,300μg/ml不同亚组,每亚组分别干预6小时,同样用Real-time PCR和western blot方法检测,观察不同浓度ox-LDL对(P)RR的mRNA和蛋白表达的影响。结果:1.HASMCs中存在(P)RR的表达。2.100μg/ml ox-LDL刺激HASMCs,可上调(P)RR mRNA和蛋白的表达,在孵育2小时后(P)RR表达开始升高,6小时达到高峰,随后逐渐下降但仍高于对照组。3.不同浓度ox-LDL刺激HASMCs,与对照组相比,50μg/ml组ox-LDL作用6小时后,可显著增加(P)RR mRNA和蛋白的表达并且达到峰值,100,150,200,300μg/ml组表达较50μg/ml组无进一步升高趋势。结论:1.HASMCs中存在(P)RR的表达。2.ox-LDL刺激HASMCs不同时间可使(P)RR mRNA和蛋白表达增多,并且具有一定的时间依赖性。3.不同浓度ox-LDL刺激HASMCs可使(P)RR mRNA和蛋白表达明显改变,是具有浓度依赖性的。4.ox-LDL可能通过上调(P)RR表达参与动脉粥样硬化的发生发展。