【摘 要】
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目的: 近来国外很多研究理论认为肿瘤中可能存在一小部分细胞,称为肿瘤起始细胞(tumor initiating cell),或者肿瘤干细胞(cancer stem cell)。此类细胞是肿瘤的“种子”细胞,可能
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目的: 近来国外很多研究理论认为肿瘤中可能存在一小部分细胞,称为肿瘤起始细胞(tumor initiating cell),或者肿瘤干细胞(cancer stem cell)。此类细胞是肿瘤的“种子”细胞,可能决定了该肿瘤的生物学行为,并与肿瘤的发展、预后、耐药等息息相关。此类细胞具有正常干细胞的一些特性,如慢周期性,可较长时间处于G0期,在DNA合成期时可摄取5-溴,2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记物并可较长时间地存在于细胞核中,故被称为标记滞留细胞(LRC,lable-retaining cell)。肿瘤干细胞理论与研究仍在初步阶段,存在较多的争议,如肿瘤内是否真正存在此类细胞,此类细胞的形态、数量、生物学特性、以及是否存在特异的标记物等。本研究试图采用BrdU标记法观察胃低分化腺癌中标记滞留细胞的数量、分布、形态及特征,为进一步研究肿瘤中标记滞留细胞提供线索和基础。 方法: 1、裸鼠胃癌肿瘤模型的建立:将培养的人胃癌细胞株BGC-823接种于裸鼠右腋窝皮下,约一周后裸鼠右腋窝下出现肉眼可见的肿瘤结节。 2、BrdU 2mg裸鼠腹腔内注射,隔日一次,连续一周。 3、注射Brdu后分别于5,10,15,20,28,35,80天杀死裸鼠,取出裸鼠右腋下肿瘤结节,保存于液氮罐中。 4、取部分肿瘤标本制成冰冻切片及石蜡切片,选用抗BrdU抗体以S-P间接法进行免疫组织化学染色,应为细胞核阳性。在光镜下随机选取10个高倍视野,计数每个视野中细胞的阳性细胞数及阳性细胞百分率,对结果进行分析。 结果:
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