微生物小分子抗菌肽的提取及生物学性质研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanlaiyizhizailiula
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乳酸菌作为益生菌被广泛应用于医药、食品及发酵工业,其除了产生乳酸外,还可代谢产生具有抗细菌、抗病毒、抗真菌及抗肿瘤等作用的小分子抗菌肽类。目前已知至少七个属的乳酸菌可通过核糖体合成机制产生小分子抗菌肽类物质,其抑菌范围广,不局限于同源细菌。迄今研究比较清楚的乳酸链菌肽(Nisin)就是乳链球菌代谢产生的小分子抗菌肽,其特殊抑菌机制是通过作用于细菌的细胞膜,在膜上形成离子通道,引起胞内物质的外漏,从而杀死细菌。目前被世界上50多个国家和地区应用为食品的天然防腐剂[8]。项目组在进行L-乳酸菌应用研究过程中发现酸菜汁中分离筛选到的乳酸杆菌属菌株HD1.7能也产生抑菌活性物质,并对其生物学性质进行了深入的研究,同时进行分离及筛选高产菌株,关于该乳酸杆菌产生小分子抗菌肽的研究国内未见报道。 1.通过对乳酸杆菌HD1.7菌株发酵液经离心、萃取、盐析、透析、层析获得具有抑菌活性的干粉,采用尿素-SDS-PAGE不连续凝胶电泳分析初步确定分子量为8600左右的小肽类,扩大了小分子抗菌肽的研究范围[9]。 2.对其热稳定性、酶敏感性、不同pH下的抑菌效果等生物学性质进行了初步研究,发现此小肽的生物学性质稳定、耐热性强、抑菌效果好,可开发为天然食品防腐剂,为今后开发成高效、低毒的新型抗生素提供出一种新的选择[8]。 3.通过表型鉴定及16SrRNA序列分析,并与相似菌株进行同源性比较证明乳酸杆菌HD1.7为副干酪乳杆菌。 4.通过改变培养基成分比例对种子培养基、发酵培养基及发酵条件进行优化,优化后的培养基使乳酸菌生物量同等条件下提高11%,小分子肽产量提高23%,为今后提高产量,扩大应用范围奠定基础。 5.采用紫外线诱变、硫酸二乙酯及紫外线—氯化锂复合诱变筛选出小分子肽高产菌株L.paracaseiUVL-25,维生素营养缺陷型菌株L.paracaseiUVLDQ-25。
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