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目的探讨急性髓系白血病患者外周血中Th17细胞和相关淋巴细胞亚群的变化与疾病阶段及危险度分层的相关关系,为疾病预后及临床免疫治疗提供实验依据。方法选取2015年8月至2017年3月在南京大学医学院附属鼓楼医院血液科就诊的急性髓系白血病患者65例,分别按疾病阶段分为初诊、未完全缓解、完全缓解3组及把初诊患者按危险度分层分为低危、中危、高组3组;另选取正常健康对照组24例。应用流式细胞学检测患者及健康对照组外周血中CD4+T淋巴细胞亚群包括Th17、Treg、Th1、Th2,及淋巴细胞免疫分型的比例;Luminex检测Th17相关细胞因子IL-17A、IL-6以及IL-1β的血浆浓度;RT-PCR方法检测外周血单个核细胞中Th17主要的转录因子RORyt及Treg的特异性标志FOXP3的mRNA表达。对比分析各指标的改变,评价患者外周血的细胞免疫状态。结果1.初诊的AML患者外周血中Th17及Treg细胞显著升高(P<0.0001),Th1细胞无统计学差异,Th2细胞明显降低(P=0.0092);当患者接受规范化化疗方案尚未达到完全缓解时,Th17细胞较对照组仍显著升高、而与初诊组无显著差异,Treg、Th1细胞较初诊及对照组无显著差异,Th2细胞较初诊组显著升高;而当患者达到完全缓解后,Th17细胞较初诊及未完全缓解组显著降低(P=0.0231,P=0.0044),Treg细胞恢复至近乎正常水平,Th1细胞的水平则较其他三组均显著升高,Th2细胞较初诊组明显升高(P=0.032)。2.根据危险度分层把AML患者分组,中、高危患者的Th17%水平较对照组显著升高(P=0.0071,P=0.0197),而低危患者虽有升高趋势,但尚无统计学差异;初诊组高水平的Treg主要分布在低中危患者组,然而高危组与其他三组却无统计学差异;无论危险度如何,Th1细胞无显著差异;Th2细胞水平的降低也主要分布在中高危组。3.AML患者初诊组的Th17相关细胞因子IL-17A、IL-6血浆浓度较健康对照组显著升高,且主要分布在中高危组;当达到完全缓解后,其水平较初诊显著降低;但接受化疗尚未达到完全缓解的AML患者,较其他三组均无统计学差异。不同疾病阶段的Th17相关细胞因子IL-1β的血浆浓度较健康对照组无统计学差异,但高危的AML患者较其他三组显著升高。4.Th17细胞分化的主要转录因子RORyt及Treg的特异性标志FOXP3的mRNA表达水平在初诊AML患者中均显著高于对照组(P<0.0001,P=0.0087);并且,化疗后其水平较初诊组有所下降。进行危险度分层后,RORγtmRNA的表达在AML的3组中均较对照组显著升高(P=0.0154,0.0011,0.0243),3组间比较,提示中危组及高危组较低危组显著升高(P=0.0029,0.0426)。FOXP3的mRNA水平,中危组及高危组较对照组显著升高(P=0.0482,0.0243),且中危组较低危组显著升高,高危组较低危组虽有升高趋势,但无统计学差异(P=0.0646)。5.AML初诊组Th17/Treg及Th1/Th2平衡发生改变,结合危险度分层,提示在中危及高危组患者中Th17/Treg平衡改变更为显著,接受规范方案化疗可以使患者体内的Th17/Treg及Th1/Th2重新达到平衡。6.具有抗肿瘤作用的NK细胞在AML初诊及未完全缓解组的患者中均有显著降低,当疾病达到完全缓解后虽较未完全缓解组显著升高,但水平仍较对照组偏低。结论1.Th细胞亚群及相关细胞因子和mRNA在急性髓系白血病患者外周血中异常表达,T细胞免疫紊乱可能参与AML的发病机制。2.高水平Th17细胞的AML初发患者往往可能处于中、高危组,且Th17细胞的水平可评估患者接受化疗后是否达到完全缓解;定量检测体内的Th17细胞可能有助于分层治疗并且协助预后的判断。此外,针对中、高危的AML患者,Th17细胞可作为一个潜在的治疗靶点,为新型的细胞免疫治疗指引方向。3.AML患者外周血中Treg细胞显著升高,并且与肿瘤的预后及危险度分层相关。4.AML患者体内Th17/Treg及Th1/Th2平衡发生改变,在中危及高危组患者中Th17/Treg更为显著;接受规范方案化疗可以使患者体内的Th17/Treg及Th1/Th2重新达到平衡。