红花抗缺氧脑损伤作用与NO及NOS mRNA表达的关系

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目的:研究红花抗缺氧脑损伤的作用,并探讨其分子生物学机制。 方法:(1)采用SD幼鼠缺氧模型,于缺氧前30min腹腔注射红花水提液(7g生药/kg体重)后,测定红花对幼鼠缺氧耐力的影响;并用硝酸还原酶法测定幼鼠窒息缺氧40min后再复氧不同时间(0h,4h,24h,48h,72h)脑组织NO含量变化。(2)用干湿质量法测定脑组织含水量;以硫代巴比妥酸法检测脑组织中MDA含量,并观察红花对缺氧再复氧24h,48h脑组织含水量、MDA和NO含量的影响;(3)采用RT-PCR法观察红花对缺氧再复氧48h脑组织中三种NOSmRNA表达的影响,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,通过凝胶图像分析软件对RT—PCR产物电泳条带进行密度分析。 结果:(1)红花水提液(7g生药/kg体重)能明显延长幼鼠的存活时间;窒息缺氧40min后再复氧24h、48h、72h NO含量明显升高,以复氧48h最为显著(P<0.01)。(2)缺氧再复氧48h,脑组织含水量、MDA明显增加,红花能减轻脑组织水肿程度、抑制MDA的生成(P<0.05、P<0.01)。红花使缺氧再复氧24h、48h幼鼠脑组织的NO含量显著降低(P<0.05、P<0.01)。(3)RT-PCR结果显示,幼鼠缺氧再复氧48h,脑内iNOS、nNOS基因表达上升(P<0.05),eNOS表达无明显变化;预先给予红花能抑制iNOS、nNOS的表达(P<0.05),对eNOS表达无影响。 结论:红花通过抑制iNOS、nNOS的表达,降低NO水平,减少脂质过氧化作用,减轻脑组织水肿程度,对缺氧脑损伤有明显的保护作用。
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