结核分支杆菌分离株DNA多态性和耐药性的初步研究

来源 :四川大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaogege0451
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该研究针对结构分枝杆菌标准株H37Rv和8株临床分离株(包括1株四川地区首次分离到的野生株和临床分离的2株初治病人均为药敏株以及5株临床分离的耐药株),先利用此物G1和L1扩增出结核分枝杆菌基因组中的16S~23SrDNA间隔区作为模板DNA,再进一步用引物AP50进行随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphism DNA,RAPD)技术进行扩增,获得了9种1或2个大小不同的DNA片段(390~1031bp).结果发现,不同菌株有不同的DNA多态性.其中,具有相同或相近片段的菌株感染的克隆株可能具有一定的同源性;药物敏感株与耐药株之间多态性差异明显;耐药株中耐药谱相似或相同的菌株间其多态性也相似.另外,该研究还对一株四川地区首次分离到的野生株(药物敏感株)进行了初步的研究.将野生株经G1和L1扩增出的16S~23SrDNA间隔区DNA片段用胶回收纯化后,与pMD18-T Vector连接,再转化入大肠杆菌感受态细胞JM109,用筛选、鉴定得到的重组质粒进行测序.经与GenBank中结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA进行序列比对,发现该株野生株与标准株的序列基本相似,推断该野生株具有与结核分支杆菌毒力相关的基因,并且,在可能的耐药基因突变位点处未发生耐药基因的改变,该研究为进一步揭示野生株的生物学特性及功能奠定了基础.
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