新型微生态制剂的研究及应用

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微生态制剂是利用肠道正常微生物成员制成的调整机体微生态平衡的活的微生物制剂,它通过优势菌群、生物拮抗等作用、改善肠道微生态环境。微生态制剂能够在数量或种类上补充肠道内所缺乏的正常微生物,可以调整并维持肠道微生态平衡,增强免疫功能,促进营养物质的消化吸收,从而达到无病防病,有病治病的目的。微生态制剂在防治肠道疾病方面,不仅安全无害,无残留,不产生抗药性,还有提高饲料转化率和畜禽生产性能,改善产品品质等作用,是国内外研究的热点。本研究依据微生态学原理,研制开发了以拟杆菌、乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌复合的微生物菌液能有效防治仔猪肠道疾病,提高生产性能。本实验直接从健康的仔猪肠道中取样,采用选择行培养基:AN培养基、BDS培养基、MRS培养基用以筛选拟杆菌、乳酸菌。对于乳酸菌、拟杆菌的鉴定采用了传统的形态观察、革兰氏染色、生理生化实验,糖发酵实验以及现代的16Sr-DNA分子鉴定法,对于两株菌的筛选则是模拟了宿主体内低pH值、高胆盐浓度的环境,筛选出了具有较强抗逆性的菌株。此外还在体外环境下筛选出对致病性大肠杆菌O45具有较高抑菌活性的乳酸菌。活菌数量的多少是微生态制剂品质优劣的关键,发酵实验围绕如何获得最大活菌数进行了系统的研究。实验主要从最适培养基的筛选与优化、最适培养条件的优化、发酵生产工艺的优化这几个方面进行研究,确立了酵母菌、枯草芽孢杆菌的最适培养基、最适培养条件和发酵条件、发酵周期。由于啤酒酵母和枯草芽孢杆菌的差异,我们分别采用分批发酵工艺和补料分批发酵工艺都获得了很好的结果,尤其是枯草芽孢杆菌采用补料分批发酵后活菌数和芽孢数都成倍增加。研究确立了乳酸菌、拟杆菌的最适培养基、最适培养条件。微生态制剂的安全性实验采用霍恩氏法,实验结果表明,该复合微生态制剂样品经口急性毒性LD50>10000mg/Kg.bw。根据急性经口毒性分级标准,该复合微生态制剂样品属实际无毒物质。动物饲喂实验表明,每天给仔猪灌喂浓度为1010cfu/mL的复合菌液2mL能显著提高仔猪增重,35日龄时实验组仔猪增重比对照组提高了20%,差异极显著(P<0.01);有效提高仔猪成活率,在整个实验期,实验组成活率为95.7%,而对照组仅为72.91%,提高成活率22.79%,差异显著(P<0.05);复合微生物菌液对预防哺乳仔猪腹泻效果明显,对照组发病率为39.1%,实验组发病率为17.4%,发病率降低了21.7%,差异显著(P<0.05)。
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