岗梅根总皂苷降血脂作用及其化学成分研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:shenbin880109
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目的:岗梅根作为岭南地区常用的药材之一,用于治疗感冒发热,肺热咳嗽,热病津伤口渴,咽喉肿痛,跌打瘀痛、扁桃体炎、咽喉炎、气管炎、百日咳等,还可消肿散瘀,用于治疗跌打损伤等。导师吴庆光在临床应用中发现岗梅根具有降血脂的作用,但文献中尚未有岗梅根药材降血脂的研究报道。本论文以总皂苷类成分为研究重点,通过一定的提取富集工艺得到总皂苷提取物,通过高血脂大鼠模型,评价总皂苷部位降血脂药效,并对总皂苷提取部位、成分分离和鉴定,为岗梅根药材临床用于高血脂症的治疗提供科学依据。方法:1.采用紫外可见分光光度法建立岗梅根总皂苷含量测定的方法。2.采用响应曲面优化法,通过考察乙醇浓度,提取时间,溶剂用量,提取次数,建立岗梅根总皂苷提取工艺。3.应用大孔树脂层析技术,通过考察树脂种类、洗脱流速、洗脱溶剂、洗脱溶剂用量,建立大孔树脂纯化岗梅根总皂苷的提取工艺条件。4.通过给予大鼠饲喂高脂饲料,建立高血脂大鼠模型,然后用不同剂量总皂苷提取物治疗,通过检测血清中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)血清瘦素(LEP)、脂联素(ADP)、IL-6、CPR的含量,评价岗梅根总皂苷提取物的降血脂作用。5.采用 TLC、SephadexLH-20、反相 ODS、HPLC-ELSD、preHPLC 等色谱技术建立岗梅根总皂苷提取物乙酸乙酯萃取部位中皂苷类化合物的分离方法,并运用现代波谱学的方法对化合物进行结构鉴定。结果:1.岗梅根总皂苷提取工艺:应用响应曲面优化法,对不同因素进行优化,确定最佳提取工艺为:溶剂:56%乙醇,时间:100min,次数:2次,溶剂用量为10倍。2.岗梅总皂苷纯化工艺:应用大孔树脂技术对提取物中的皂苷类化合物进一步,纯化富集,确定最佳工艺为:树脂为AB-8、上样流速3BV/h、洗脱剂50%乙醇、洗脱剂用量3BV(柱体积),动态吸附泄漏曲线考察结果显示上样液达到70ml时开始有泄漏,达到200ml时吸附趋于平衡。3.岗梅根总皂苷降血脂药效学研究:与高血脂模型组比较,岗梅总皂苷高、中、低剂量组均可显著降低大鼠血清中TC、TG、LDL-c、LEP、CRP水平和IL-6水平(P<0.01),与高血脂模型组比较,岗梅总皂苷中、低剂量可显著升高大鼠血清HDL-c水平(P<0.05),岗梅总皂苷高剂量可极显著升高大鼠血清HDL-c水平(P<0.01),岗梅总皂苷高剂量可显著升高大鼠血清ADP水平(P<0.05)。4.从岗梅根药材中分离鉴定得到5个化合物,其中2个为新的含磺酸基的化合物物,1个于岗梅根中首次分离得到,命名为asprellcosides A、B、C。2个已报道化合物:19-去氢乌苏酸、Randiali acid B。结论:1.通过高血脂大鼠模型证明岗梅根总皂苷具有降血脂作用,为岗梅根新的临床功用的研究开发奠定实验基础。2.分离鉴定的三萜类化合物为皂苷的单体化合物为岗梅根制定质量标准提供标准物质。3.本研究采用响应曲面优化法、大孔树脂对岗梅根总皂苷的提取、富集工艺进行研究,最终确定出合理有效的工艺路线,为工业生产提供应用基础。
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