抗草甘膦基因CP4-EPSPS表达载体构建及对甘薯的遗传转化研究

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甘薯是重要的粮食、饲料、工业原料及新能源。杂草危害对甘薯生产影响较大,可使其减产5%-15%。草甘膦是一种高效低毒的化学除草剂,可降低除草劳动强度、提高除草效率。将抗草甘膦基因CP4-EPSPS转入甘薯,可以获得有草甘膦抗性的品种。本研究从抗草甘膦大豆中扩增了CP4-EPSPS基因,将其安装在载体pMD18-T上,并与载体pCAMBIA1301连接,成功构建了双元植物表达载体pCAMBIA1301-CP4-EPSPS。以真空渗透辅助的农杆菌介导转化法转化甘薯品种广薯87号和福薯18号的茎段,获得了转基因植株。此方法免去了组培过程,转化后直接扦插,简化了转化程序,提高了转化效率。PCR检测结果表明,72个转化株中有5个呈现阳性,其中广薯87号1株,福薯18号4株。草甘膦耐受性鉴定结果显示,3株转基因福薯18号可以耐受0.12%的草甘膦。以上结果为抗草甘膦甘薯的选育及商业化生产奠定了基础,同时也证明真空渗透辅助、农杆菌介导的茎段转化法在甘薯上是可行的。
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