活性氧(reactive oxygen species,ROS)是人体氧代谢所产生的一种中间产物,活性氧能够介导蛋白质氧化的生化机制。ROS能够诱导蛋白质氧化,最终导致机体生理和病理的改变,乃至加速衰老过程。过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(OH.)都是ROS的一种,并且都具有很强的氧化能力,可以在生理或者病理条件下,对蛋白质翻译后的过程进行修饰。这种修饰可以造成蛋白质氧化、导致蛋白质变性,产生一系列反应,并且最终可能引发各种疾病。纤维蛋白原是人体内血浆中的一种重要蛋白质,是血浆蛋白中易被氧化攻击的一种蛋白质。它的主要生理功能是参与凝血的最后一步,在凝血酶的作用下释放出纤维蛋白单体,并共价交联为稳定的可溶性蛋白纤维。有相关研究表明,过量的纤维蛋白原是冠心病发病因素之一,并与多种发病机理相关。本论文就针对过氧化氢和羟基自由基对纤维蛋白原的氧化损伤进行研究,并进行了光致活性氧淬灭方法检测生物抗氧化剂动力学模型分析。本文具体工作如下:1.H2O2诱导的氧化应激对纤维蛋白原纤维化的影响:通过紫外可见光谱,圆二色光谱,原子力显微镜,Zeta电位和纳米粒度来测定其性质。圆二色光谱主要用来表征蛋白质的二级结构,α-螺旋、β-片层等含量的变化可以推断出过氧化氢对纤维蛋白原的损伤。用原子力显微镜测定样品的表面形貌,观测加入过氧化氢之后,纤维蛋白原分子呈现出不同的聚集状态。实验结果均表明,过氧化氢对纤维蛋白原有损伤作用并改变了其构象。2.芬顿反应产生的羟基自由基对纤维蛋白原纤维化的影响:通过紫外可见光谱,圆二色光谱,原子力显微镜,Zeta电位和纳米粒度来测定其性质。紫外可见光谱测量出280 nm处特征峰的变化,可推测出纤维蛋白原中色氨酸和酪氨酸残基是否改变。ζ电位绝对值的变化表明过氧化氢导致纤维蛋白原分子表面的带电状态改变。实验结果均表明,羟基自由基对纤维蛋白原有损伤作用,改变了其构象。3.光致活性氧淬灭方法检测生物抗氧化剂动力学模型分析:在本工作中,我们提出了一个以对苯二甲酸(TA)为氧化探针,基于TA与AOs竞争Ti O2光催化产生氧化物质反应的动力学模型,其中反应过程中形成的具有荧光活性的2-羟基对苯二甲酸(HTA)作为荧光探针,标定AOs的抗氧化动力学性质。