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乙型肝炎(hepatitis B)是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的,以肝脏炎性病变为主,并能引起其他多器官病变的疾病。部分乙肝患者转化为肝硬化及肝癌,严重威胁生命健康。文献报道,HBV感染可以引起肝细胞发生内质网ER(endoplasmic reticulum,ER)应激,而ER应激会激活非折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)。MANF(Mesencephalic Astrocyte-derived Neurotrophic Factor)是一种对ER应激敏感的蛋白,在ER应激时特异性高表达。MANF在细胞中起着保护细胞避免ER应激导致的细胞凋亡。我们的发现发现,MANF的启动子区存在ER应激反应元件,但UPR分支信号如何影响MANF的表达目前还不清楚。本研究主要观察HBV诱导的肝组织的ER应激以及UPR分支通路对MANF表达的影响。结果如下:(1)通过对收集的肝炎病人组织切片免疫组化及肝炎病人组织Q-PCR方法检测,发现ER应激主要标志蛋白BIP,CHOP的的表达上调,且表达水平随着肝炎的病程进展逐渐升高。(2)采用免疫组化及Q-PCR方法对肝炎病人组织切片检测发现,ER应激敏感蛋白MANF的表达量上调,UPR分支蛋白XBP1表达改变不明显。采用免疫荧光技术对肝炎病人切片进行检测,结果发现XBP1s蛋白与MANF蛋白在肝脏组织细胞中有共定位,该结果提示XBP1s与MANF可能有一定的关系。免疫共沉淀证明XBP1与MANF蛋白质有相互作用,染色质免疫共沉淀证明XBP1s蛋白可以结合MANF的启动子区域,提示XBP1可以调节MANF的转录。(3)利用IRE1的核糖核酸酶抑制剂STF-083010处理肝癌细胞以抑制XBP1 m RNA的剪切后发现,STF-083010不影响IRE1的蛋白表达,但抑制XBP1s及MANF的表达。同样我们采用XBP1-si RNA抑制XBP1s蛋白的表达,发现MANF蛋白的表达水平也降低,提示XBP1正性调节MANF的表达。结论:(1)HBV感染可诱导ER应激,且随着肝炎病程逐渐加重;(2)乙肝患者肝组织中MANF蛋白以及m RNA的表达明显增加,而XBP1的改变不明显;(3)XBP1与MANF有相互作用;(4)XBP1可以促进MANF的转录。