脑血管病(Cerebrovascular disease)是现代神经康复学研究的最主要的内容之一,近年来的死亡资料分析表明,循环系统、肿瘤和呼吸系统三类疾病分别列于死因的第一、二、三位。循环系统中的心脑血管疾病是中老年人的常见病和多发病,其中因脑缺血性死亡占脑血管疾病死亡的70-80%。因此,对治疗脑缺血的药物的研究已成为热点。长春西汀(Vinpocetine)是从夹竹桃科小蔓长春花提取的生物碱。经合成、筛选一系列衍生物而开发出的阿扑长春胺酸乙酯制剂,主要用于增进和改善大脑氧的供给,对大脑血管有选择性作用,对心脏、血管、血压等无影响。目前是临床治疗脑缺血的常用药物。上市的普通注射制剂配伍禁忌较多,易发生溶血现象,安全性差。静脉注射用脂肪乳剂一般是以植物油(主要成分为脂肪酸甘油三酯)为油相,精制天然磷脂为乳化剂,经高压均质制成的o/w型乳剂。长期以来,脂肪乳剂主要作为一种浓缩的高能量肠外营养液用于临床,为不能进食和严重缺乏营养的患者(如术后或大面积烧伤或肿瘤患者)提供热能和必需脂肪酸,能完全被机体代谢与利用。随着临床治疗需求和药剂学本身的发展,静脉注射用脂肪乳剂已逐步成为一种新型药物传递系统,其体积小、能量高、静脉刺激性小、可外周静脉给药等,并且在提高药物溶解度和稳定性、减轻不良反应、缓释给药和基因治疗等方面有广阔的应用前景。本研究制备出长春西汀亚微乳注射剂,减少了配伍禁忌,不易溶血,提高了药物临床使用的安全性。目的:本研究选取长春西汀作为模型药物,制备成长春西汀亚微乳冻干制剂,为该药的临床使用增加一种更安全的剂型供选择。试验方法与结果:1、长春西汀亚微乳处方前研究:通过长春西汀亚微乳处方前研究建立了长春西汀亚微乳的HPLC含量测定方法,通过对方法的标准曲线、稳定性、重复性及回收率考察,证明方法重复性良好,准确度高,专属性强,不仅适用于乳剂中药物含量的测定,而且可以用于长春西汀与其分解产物及其他杂质的测定,实验中还考察了各种外界因素对长春西汀稳定性的影响。结果表明,长春西汀在碱、光照、氧化条件下降解,酸性环境及高温对药物影响较小。2、长春西汀亚微乳处方工艺研究:以粒径和稳定性作为主要评价指标,进行长春西汀亚微乳冻干制剂的处方筛选和工艺研究,研究了制备工艺中一些关键参数的影响,考察了制备工艺中乳化方法、乳化温度、乳化时间、均质压力及均质次数对乳化效果影响,筛选了最优工艺条件。在处方中随着药物含量升高稳定性逐渐降低,最终确定最优处方和工艺,在稳定性及临床给药剂量之间取得平衡。最终制备的长春西汀亚微乳稳定性达到要求,粒径分布均匀,亚微乳乳滴的50%粒径在216nm以内。进行放大工艺研究,对最优处方进行放大实验和重现性试验,考察处方工艺的重现性和工业化生产的可行性并筛选出放大处方初乳制备方法,与小剂量制备相比,放大工艺稳定,制备样品质量与小体积制备方法无差异。最终确定放大100ml-500ml亚微乳工艺制备的长春西汀亚微乳冻干乳,其复溶平均粒径为216nm±5nm,pH值在5.9-6.1之间,显微镜下观察无>5μm粒子。3、长春西汀亚微乳冻干研究:进行亚微乳冻干研究,筛选了冻干保护剂的种类,浓度及冻干程序。研究结果表明,在考察的五种冻干保护剂中,麦芽糖、蔗糖、葡萄糖效果较好,其中以麦芽糖为最佳;对冻干程序筛选包括预冻温度,预冻速度筛选。获得可稳定贮藏的长春西汀亚微乳冻干制剂,其冻干保护剂为麦芽糖,浓度为25%,预冻温度为-45℃,预冻方式为快冻。4、长春西汀亚微乳灭菌研究:进行了灭菌研究,对亚微乳进行湿热灭菌,60Co照射灭菌,过滤灭菌考察,结果发现,60Co照射灭菌后样品外观变色,过滤灭菌操作阻力过大,效率低下,且可能破坏亚微乳结构,造成样品的不稳定。湿热灭菌对亚微乳外观,有关物质均无影响,且灭菌操作简单。湿热灭菌前对亚微乳pH调节进行了研究,结果表明,该亚微乳不宜灭菌前调节pH。最终确定灭菌程序为121℃,15min热压灭菌,灭菌前不调节pH。5、长春西汀亚微乳稳定性研究:考察了长春西汀亚微乳在高温、强光下的稳定性,结果表明60℃下样品外观发生明显变化,强光照射有关物质明显增加。长春西汀亚微乳在不同稀释液中得物理稳定性研究结果显示,以临床常用注射液稀释5-20倍24小时稳定,说明稀释稳定性良好。长期放样结果表明,长春西汀冻干乳在40℃下避光放置3个月理化性质无明显变化。6、长春西汀亚微乳安全性初步评价:通过异常毒性检查法及溶血性试验对长春西汀亚微乳安全性进行初步评价。结果表明长春西汀亚微乳冻干制剂无明显异常毒性,体外无明显溶血作用。结论:本研究所制备的长春西汀亚微乳冻干制剂制备工艺稳定性好,其复溶时具有良好的稳定性和稀释稳定性,体外无溶血,无异常毒性。