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研究背景和目的重症急性胰腺炎(SAP)是一潜在的致命性机能紊乱,起病急骤,病情危重,并发症多,其死亡率仍然高到20%～40%。其中多器官功能障碍(MODS)是SAP病程早期的主要死因,尽管有学者们提出了相当一部分理论解释SAP的发病机制,但确切的发病机制尚不明确。因此,重症急性胰腺炎长期以来为消化内科研究的难点和重点。近年来研究表明,白细胞大量激活,释放炎性介质以及细胞因子进入血循环,触发炎症介质的瀑布样级联反应,是SAP并发MODS的病理生理基础。其中肿瘤坏死因子α(TNF-α)具有多种生物效应,在所有炎症介质中处于始动地位,过量TNF-α能刺激其他细胞因子的产生,起到“扳机”样作用。针对TNF-α的靶向治疗随之成为未来SAP抗炎症介质疗法的重要靶点。Infliximab为抗TNF-α的人鼠嵌合单克隆抗体,与多种形式的TNF-α有较强结合能力,从而阻断其促炎作用,以期达到治疗SAP并MODS的目的,故为SAP的抗炎症介质治疗开辟了一条新思路。2001年, BhaticM首次提出了在AP发作和器官功能衰竭之间存在一个可供抗炎症介质治疗的“治疗窗”(therapeutic window)新概念,为解决既往SAP早期干预治疗缺乏具体可操作时间等难题提供了新思路。前期研究显示建模后6h为急性坏死性胰腺炎(ANP)并多脏器功能障碍(MODS)模型的TNF-α反应高峰,可能为ANP并MODS模型的抗炎症介质治疗窗。既往SAP早期干预治疗的时间不一,缺乏统一的客观依据和诊治指南。惜迄今国内外也未见抗TNF-α单抗Infliximab治疗ANP并MODS模型的报道。本文通过两部分实验,第一部分:Infliximab治疗ANP并MODS模型的时-效关系,探讨早期使用Infliximab的实验疗效;第二部分:Infliximab和奥曲肽对ANP并MODS模型的实验疗效,旨在首次阐明抗炎症介质治疗窗早期应用Infliximab和奥曲肽对ANP并MODS模型的改善价值,为今后临床研究提供实验依据。方法(1)第一部分:Infliximab治疗ANP并MODS模型的时-效关系:雌性SD大鼠112只,随机分入假手术组、模型组、6h Infliximab治疗组和9h Infliximab治疗组,每组各28只大鼠;采用Aho法并加以改良,经胰胆管逆行注射浓度为4.5%牛磺胆酸钠(NaTc)制备ANP并MODS大鼠模型;假手术组同法经胰胆管内逆行注射生理盐水。治疗组分别于建模后6h、9h经鼠尾静脉注射Infliximab治疗;各组取8只模型大鼠观察至建模后24h处死,经腹主动脉采血检测PaO2/FiO2,后经鼠尾静脉采血分别检测血清淀粉酶、血清TNF-α、总胆红素、肌酐等指标;取胰腺组织制做成病理切片,于光镜下观察胰腺组织并进行病理评分;各组另20只雌性SD大鼠观察至建模后24h比较其生存率。(2)第二部分:Infliximab和奥曲肽对ANP并MODS模型的实验疗效:雌性SD大鼠140只随机分为假手术组、模型组、奥曲肽治疗组、Infliximab治疗组和联合治疗组,每组各28只大鼠。同法制备ANP并MODS大鼠模型,治疗组于建模后6h抗炎症介质治疗窗早期,经鼠尾静脉注射Infliximab、奥曲肽等药物。各组取8只模型大鼠观察至建模后24h处死,经腹主动脉采血检测PaO2/FiO2,后经鼠尾静脉采血分别检测血清淀粉酶、血清TNF-α、总胆红素、肌酐等指标;取胰腺组织制做成病理切片,于光镜下观察胰腺组织并进行病理评分;各组另20只雌性SD大鼠观察至建模后24h比较其生存率。结果(1)第一部分:①两个治疗组血清TNF-α、血清淀粉酶、总胆红素和肌酐值均较模型组显著降低(P<0.05),而PaO2/FiO2较模型组显著升高(P<0.05);其中6h治疗组血总胆红素和肌酐水平降低更为显著(P<0.05)。②两治疗组胰腺组织病理评分较模型组显著降低(P<0.05),且6h治疗组降低更为显著(P<0.05)。③两治疗组模型大鼠24h生存率有所提高,但较模型组未见显著差异性(P>0.05)。(2)第二部分:①各治疗组血清血清淀粉酶、TNF-α、总胆红素和肌酐值均较模型组显著降低(P<0.05),而PaO2/FiO2较模型组显著升高(P<0.05);在各治疗组间,Infliximab治疗组和联合治疗组TNF-α、血总胆红素和肌酐水平较奥曲肽治疗组显著降低(P<0.05);且联合治疗组较Infliximab治疗组降低更为显著(P<0.05)。②各治疗组的胰腺组织光镜下病理组织评分较模型组显著降低(P<0.05);在各治疗组间,Infliximab治疗组和联合治疗组胰腺组织病理评分较奥曲肽治疗组明显降低(P<0.05);且联合治疗组较Infliximab治疗组降低更为显著(P<0.05)。③各治疗组大鼠的24h生存率均较模型组有所提高,尤以联合治疗组24h生存率最高90%,但较模型组(65%)无显著差异性(P>0.05)。结论1、Infliximab可显著降低ANP并MODS模型的TNF-α水平,改善胰腺炎症和降低MODS发生率,且早期应用的效果更佳。2、Infliximab和奥曲肽联用可显著改善ANP模型脏器功能和胰腺病理损伤;并在一定程度上提高ANP模型大鼠的生存率。