论文部分内容阅读
啤酒废酵母是啤酒生产中的主要副产物，我国每年生产45万吨废啤酒酵母。目前，废啤酒酵母没有得到很好的利用。浪费了大量的生物资源。啤酒废酵母含有约2-10％的RNA。可以从啤酒废酵母中提取RNA，变废为宝。核酸及核苷酸产品在医学上、保健食品上、农业上，调味品以及遗传工程中具有十分重要的用途。脱核酵母是重要的饲料蛋白源。本项研究包括以下几个方面，第一，从废啤酒酵母中提取RNA的研究；第二，用桔青霉发酵生产核酸酶的研究；第三，用核酸酶水解核酸的研究；第四，从核酸水解液中分离核苷酸的研究。对从啤酒酵母中提取核酸的几个条件进行了优化，得到了最优提取工艺是：盐浓度为10％，提取时间为4小时，酵母浓度为10％，冷却温度为4℃，提取温度为95℃，抽提液pH2-2.5，将RNA沉淀用pH2-2.5的乙醇洗涤，然后在60℃左右真空干燥，粉碎即得成品，所得成品的核酸提取率为3.4％，核酸含量为78％。为了生产核苷酸，本研究选择了桔青霉发酵生产核酸酶工艺。由于桔青霉原始菌株产酶活低，故对出发菌株进行诱变。出发菌株经过一系列诱变处理，筛选的到一株高产核酸酶的菌株，本研究同时对桔青霉发酵培养基的组分、发酵条件等因素，作了一系列优化试验，得到了较为合理的发酵工艺。最佳发酵培养基配方为KHI2PO4 0.05％，K2HPO40.03％，酵母膏+蛋白胨0.7％，CaCl20.02％，MgSO40.04％，ZnSO40.03％，葡萄糖5％，发酵温度为30℃，时间为66小时，摇床转速180r／min装液量为50ml。本研究还对核酸酶水解核酸的条件进行优化，得到了最佳水解条件是：温度55℃，pH5，底物浓度0.75％，水解时间2小时，底物与酶液之比为4：1。并且对酶解后的核苷酸混合液用离子交换层析法，进行了分离。