论文部分内容阅读
目的： 检测瘦素对上皮性卵巢癌SKOV3细胞的增殖效应，探讨STAT3siRNA干扰阻断JAK/STAT3通路后，瘦素对卵巢癌SKOV3细胞中TERT的影响机制。试图了解瘦素对卵巢癌发生发展的影响及其机制，为提高卵巢癌的早期发现及手术预后治疗提供新的理论依据，为卵巢癌寻找新的肿瘤标记物和基因治疗靶点。 方法： （1）通过MTT细胞增殖实验检测瘦素对上皮性卵巢癌SKOV3细胞系的增殖效应，并测定出促使细胞增殖的最佳瘦素作用浓度和最佳作用时间。 （2）实验分三组即空白对照组（仅含SKOV3细胞），STAT3siRNA转染后的SKOV3细胞组、阴性对照的N-control转染的SKOV3细胞，每组分别设两个复孔，接种于6孔板上，置于37℃、5％CO2条件的培养箱内进行培养，应用RT-PCR检测三组实验分组细胞内目的基因STAT3mRNA水平上的表达差异。 （3）实验分四组即空白对照组（仅含SKOV3细胞），siRNA转染后的SKOV3细胞组、瘦素＋siRNA转染后的SKOV3细胞组、瘦素+SKOV3细胞组，每组分别设两个复孔，接种于6孔板上，置于37℃、5%CO2条件的培养箱内进行培养，应用RT-PCR检测四组实验分组细胞内两个目的基因STAT3和TERT在mRNA水平上的表达差异。 （4）用SPSS13.0软件对所得数据进行处理，采用随机区组方差分析等统计学方法对数据进行统计学分析。 结果： （1）经MTT细胞增殖实验检测后，瘦素诱导上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖的最佳瘦素浓度是100ng/ml，最佳作用时间为48小时。 （2）转染实验的三组细胞通过RT-PCR检测发现STAT3siRNA转染后的SKOV3细胞组中STAT3的mRNA表达水平较空白对照组及阴性对照的N-control转染的SKOV3细胞组下降明显，P值＜0.05有统计学意义。 （3）瘦素实验四组细胞通过RT-PCR检测发现瘦素+SKOV3细胞组STAT3和TERT在mRNA水平上的表达均高于其它三个实验细胞组，且明显高于瘦素+siRNA转染后的SKOV3细胞组，而瘦素＋siRNA转染后的SKOV3细胞组与siRNA转染后的SKOV3细胞组比较两个目的基因的表达未见明显差异。 结论： （1）瘦素对卵巢癌SKOV3细胞具有增殖效应，且随着瘦素浓度及作用时间的增长具有一定的依赖性。 （2）瘦素诱导JAK-STAT3信号传导通路促进上皮性卵巢癌SKOV3细胞中STAT3及TERT的表达增加，通过JAK-STAT3信号传导通路影响TERT的表达，可能对卵巢癌的发生发展起到一定的促进作用。