野蔷薇抗白粉菌基因表达谱分析

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月季属于蔷薇科(Rosaceae)蔷薇属(Rosa)植物,是世界四大切花之一。在月季的生产过程中,特别是设施(如温室大棚)栽培条件下,白粉病(Powdery Mildew)已成为切花月季生产中最为严重的病害之一,严重损害了花农的利益。如果从遗传改良入手能够培育出具有白粉病抗性的栽培品种,不仅减少生产成本,而且更具有重要的生态意义。面对月季遗传改良和生产中严重的白粉病危害问题,许多研究人员提出把野生蔷薇属资源的优异性状/基因转移到现代月季的栽培品种中,拓宽其遗传基础、培育抗白粉病的品种作为今后月季抗病育种的主要方向。本研究首先进行了菌种鉴定和植物抗性鉴定,然后研究了抗病和感病野蔷薇在白粉菌诱导下转录组表达谱,并对表达谱数据进行分析;另外对筛选出的可能参与抗病反应的基因进行基因表达模式研究。研究结果如下:  (1)对野蔷薇的株系1,株系4,株系13的增殖培养基进行筛选。结果为野蔷薇的株系1,株系4,株系13的增殖培养基配方为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.01 mg/L+30g/L蔗糖+7.5g/L琼脂,但在野蔷薇的株系1的增殖培养后需增加一个壮芽培养阶段,其配方为MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.01 mg/L+30g/L蔗糖+7.5g/L琼脂。  (2)综合形态观察法和分子分类法的鉴定结果,得出野蔷薇上的白粉菌为Podosphera pannosa。  (3)综合田间病情观测、孢子悬浮液喷洒扦插苗法及显微观测对野蔷薇的株系1,株系4,株系13对白粉病的抗性鉴定结果,得出野蔷薇13号为高抗材料,野蔷薇1号为中感材料,野蔷薇4号为高感材料。  (4)在白粉菌诱导24小时时,抗病材料和感病材料中分别有1900和1614个转录本差异表达,其中在抗病材料中单独上调的基因有1426个,单独下调的基因有240个;在白粉菌诱导96小时时,抗病材料和感病材料中分别有1839和2369个转录本差异表达,其中在抗病材料中单独上调的基因有413个,单独下调的基因有392个。  (5) GO功能富集性分析显示,抗病和感病中的差异基因存在大量的功能富集。比较抗病和感病差异基因的功能,抗病中单独存在的功能主要是 glucan metabolic process;guard cell development;cellulose metabolic process;callose deposition in cell wall;photosynthesis, light harvesting in photosystem II;abscisic acid biosynthetic process; secondary cell wall biogenesis; hydrolase activity; microtubule;1,3-beta-D-glucan synthase complex。  (6)以野蔷薇GADPH为内参,对差异表达的8个基因进行荧光定量pcr分析其表达模式,发现7个基因在抗病和感病材料中的表达模式不一样,可能参与了抗病反应。
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