蔗渣载体固定化酶的制备及处理蔗汁的初步研究

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在澄清过程去除非蔗糖分,是制糖生产中的关键环节。目前国内绝大部分甘蔗糖厂采用的混合汁澄清方法是亚硫酸法,该法具有清汁钙盐含量较高,能耗高等缺点。因此,国内外有研究者采用酶法去除蔗汁中的非蔗糖分,效果显著,降低了能耗和生产成本。但是目前常用的游离酶处理过程,存在酶稳定性差,容易失活,产物分离纯化困难,产品的成本高等缺点,亟待改进。蔗渣是糖厂的副产品,产量大,成本低,含有大量的纤维素,且不溶于水,机械性能较好。纤维素含有大量的自由羟基,其衍生物可与酶蛋白分子结合,制备固定化酶。本论文研究将游离酶进行固定化,制备蔗渣纤维固定化酶,并将其用于处理甘蔗混合汁,从而达到降低酶的使用成本,且便于连续化生产等目的。通过氧化法改性蔗渣纤维制备固定化酶的载体,研究采用吸附和共价结合两种方法共同作用,分别固定化耐高温α-淀粉酶和果胶裂解酶。考察了载体制备和固定化酶的最佳工艺条件,并将制备的固定化耐高温α-淀粉酶和固定化果胶裂解酶用于甘蔗混合汁的澄清过程。主要研究内容及结果如下:(1)研究了各反应因素对改性蔗渣纤维载体制备的影响,优化制备条件。最优工艺条件下蔗渣纤维醛基含量为7.589mmol·g-1。采用扫描电镜(SEM)和傅立叶红外光谱法(FTIR)对制备的双醛蔗渣纤维的性能和结构进行表征。结果表明,蔗渣得到了良好的改性。(2)以氧化改性蔗渣纤维为载体固定化耐高温α-淀粉酶,对固定化条件和固定化酶的性能进行研究。结果表明,与游离酶比较,固定化耐高温α-淀粉酶的稳定性好,耐热性增强,耐碱性也提高,具有良好的催化活性。对固定化耐高温α-淀粉酶水解淀粉的重复使用性进行了研究,结果表明,重复使用6次之后,酶活仍可以达到初次酶活的76.51%,稳定性好;保存7天后,酶活仍为初次酶活的86.75%,而配制的游离酶液则完全失去活性,固定化提高了酶的存储稳定性。(3)以氧化改性蔗渣纤维为载体固定化果胶裂解酶,对固定化条件和固定化酶的性能进行研究。结果表明,与游离酶比较,固定化果胶裂解酶的稳定性好,耐热性增强,耐碱性也提高,具有良好的催化活性。对固定化果胶裂解酶水解果胶的重复使用性进行了研究,结果表明,重复使用6次之后,酶活仍可以达到初次酶活的66.72%,稳定性好;保存7天后,酶活仍为初次酶活的86.41%,而配制的游离酶液则完全失去活性,固定化提高了果胶裂解酶的存储稳定性。(4)研究采用两种固定化酶处理甘蔗混合汁,并与游离酶的处理效果进行对比研究,结果表明,采用固定化酶处理混合汁,处理后蔗汁的锤度和简纯度变化较小,且在较温和的条件下达到较好的澄清效果,色值降低程度也大于游离酶。
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