我们从本实验室构建的家蚕cDNA文库中筛选得到一条的cDNA，经生物信息学分析发现其包含TPR(TetratricoPeptid.Repea.domain)保守结构域，将其命名为家蚕BmTPRn基因。家蚕B.TPRn基因是我们在家蚕中首次发现的一个TPR蛋白超家族基因，它只含有一个外显子；家蚕BmTPRn基因cDNA长为135.bp，ORF大小为85.bp，编码285个氨基酸，预测分子量为31.1kD，等电点为4.75。　　 本实验根据cDNA序列的ORF框设计上下游引物，PCR扩增出目的基因，插入融合表达载体pET-28a(+)，成功构建重组表达质粒并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞，经PCR、酶切鉴定以及测序分析证实重组正确。终浓度为0.5mM的IPTG诱导后裂解菌体做SDS-PAGE分析，在35kD处有特异性蛋白条带，与预测值相符。成功的通过Ni-NTA柱亲和层析得到纯化的重组蛋白。用该重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，ELISA检测效价在1:1.800以上。提取家蚕各时期及组织的RNA，设计特异引物利用RT-PCR检测BmTPRn在转录水平上差异。结果表明：BmTPRn基因在卵巢中的转录水平明显高于其他的组织；在各时期中，基因BmTPRn在蛹的转录水平最高。提取家蚕卵、五龄幼虫、蛹、蛾四个时期及五龄幼虫的头、卵巢、丝腺等组织的总蛋白，进行免疫印迹实验，结果显示，在五龄幼虫的卵巢中BmTPRn基因表达量明显高于其他组织和RT-PCR的实验结果相一致，在头中没有检测到表达信号。BmTPRn蛋白在家蚕五龄幼虫、蛹、蛾均检测到表达信号。以家蚕Bm5细胞进行免疫细胞化学实验，结果显示，BmTPRn蛋白在细胞核与细胞质当中均有分布。我们推测BmTPRn基因是家蚕重要的生殖发育相关的基因。这些结果为深入研究家蚕BmTPRn基因的功能奠定了基础。