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临床输血治疗的目标是提供安全、合适的血液制品给适合的患者并达到预期的治疗效果。血小板是最小的血细胞，临床上血小板输注常应用于治疗血小板数量或功能异常的病患，如再生障碍性贫血、恶性血液病、骨髓抑制、骨髓衰竭等，以达到止血或预防出血的目的。应用血小板治疗须考虑诸多因素，如患者的病情、患者自身的血小板的计数和功能、血小板减少的原因、是否有出血或同种免疫等情况。现阶段国际规定血小板体外储存的时间是5天。 微小RNA（microRNA，miRNA）是一类非编码单链RNA，参与调控转录后信使核糖核酸(mRNA)的表达。探索miRNA作为诊断或治疗新方法成为近年来研究的热点。无核细胞中也存在miRNA，但miRNA和血小板功能和储存损伤之间研究尚不是很多,本论文研究miRNA表达与血小板相关功能的关系，并探索miRNA是否有潜能作为血小板储存损伤的生物标记。 目的: 探讨机采血小板储存过程中miRNA的表达变化，及其与特异性血小板ADP受体（P2Y12）、血管扩张刺激磷酸蛋白（VASP）、血小板膜糖蛋白 GPⅡb/Ⅲa以及血小板聚集功能关系。 方法: 检测15例 O型健康男性捐献血小板在22±2℃的储存条件下血小板内miRNA表达谱及变化。采用实时荧光定量 PCR法验证血小板聚集有关联的miRNA：miR-223、miR-21-5p、miR-21-3p、miR-155、let-7b-3p、miR-3162在储存过程中的变化。运用流式细胞术检测血库的日常储存条件下机采血小板内P2Y12、VASP、血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及血小板凋亡率的变化。 结果: miRNA表达谱芯片结果显示机采血小板储存第5天与第2天相比，有167种miRNA表达量有显著差异，其中表达量升高的有47种，降低的有120种。储存第8天与第2天相比，表达差异的miRNA有230种，表达量增高的有28种，降低的有202种。通过KEGG数据库对miRNA的靶基因预测结果显示变化的 miRNA的靶基因主要与血小板激活、血小板脱粒、血小板源生长因子受体信号通路、干细胞分化有关。机采血小板在22±2℃的储存条件下，凋亡率不断升高，第2天凋亡率为2.87％，第五天为9.46%，储存至第8天时可达22.01%。筛选与聚集相关 miRNA验证结果表明，miRNA如 miR-21-3p、miR-21-5p、miR-155储存第5天时表达降低（P＜0.05），而miR-223、miR-3162、let-7b表达升高（P＜0.05）。储存过程中，血小板中的蛋白 VASP磷酸化水平降低，从72.7%降至18.7%，同时也意味着 P2Y12的活化则在血小板储存过程中逐渐增高。血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa则在机采血小板储存的第2、5、8天的表达阳性率分别为99.16±0.34%，98.91±0.73%，98.38±0.74%，在储存的过程中表达相对稳定。 结论: 血小板中含有大量的 miRNA，miRNA表达量随着血小板在血库保存时间延长，呈不同变化趋势。升高的 miRNA数量远比降低的 miRNA少，miRNA表达量降低为主要趋势，这些变化的 miRNA通过影响相应的蛋白水平影响血小板的聚集功能。miR-223、miR-21、let-7b可能在血小板活化聚集通路中，通过相关的信使RNA从而调节血小板中蛋白的表达，进而影响血小板的聚集功能。血小板 miRNA的靶基因还与血小板活化、血小板脱粒、血小板源生长因子受体信号通路、干细胞分化等相关。miRNA显示了作为血小板储存损伤的的生物学标记的潜能。其中miR-223显示了对P2Y12的调控、对血小板活化通路的影响，且易检测的特征，具有成为首个血小板储存损伤的生物学标记的潜质。