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鳞翅目夜蛾科昆虫是农业和林业上的重要害虫,其中粉纹夜蛾(Trichoplusiani)作为夜蛾科昆虫的代表,其寄主范围十分广泛,为害具有世界性。虽然苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)制剂以及转Bt基因植物在粉纹夜蛾的防治上取得了成功,然而2003年在加拿大的商业化蔬菜温室发现了粉纹夜蛾对Bt制剂Dipel(主要成分为Cry1Ac)发展了抗性。这也是目前世界上继小菜蛾(Plutellaxylostella)之后第二个于商业化生产中发展抗性的昆虫。本文经过实验室的BtCry1Ac的连续筛选,建立了对Cry1Ac高度抗性的粉纹夜蛾抗性种群(GIP-Cry1Ac),揭示了其抗性遗传基础为常染色体不完全隐性遗传,符合单基因遗传规律,并证明了其与来源不同的抗性种群(GLEN-Cry1Ac)是由相同基因控制的抗性遗传;研究了其中肠防御体系—围食膜(peritrophicmembrane,PM)在防御BtCry1Ac中的作用;发现并鉴定了与所有已知的昆虫蛋白不具有任何序列相似性的粉纹夜蛾围食膜蛋白的新家族—TnPM-P42,确认TnPM-P42-like蛋白在美洲棉铃虫(Helicoverpazea)和烟芽夜蛾(Heliothisvirescens)等夜蛾科昆虫围食膜中的存在。
采用药剂饲料表面覆盖法,完成了BtCry1Ac对抗性粉纹夜蛾的筛选,建立了一株抗性种群(GIP-Cry1Ac)。初孵幼虫的生物测定结果显示,GIP-Cry1Ac相对于敏感(Susceptible)种群的抗性指数达到3,688倍,而未经筛选的原始种群的抗性指数仅为10倍,这说明粉纹夜蛾对Bt毒蛋白的抗性水平上升很快。
利用经典的遗传学方法揭示了抗性种群的抗性遗传基础。首次证明了来源不同的GIP-Cry1Ac和GLEN-Cry1Ac的抗性是由相同基因控制的。