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目的:结肠炎相关性结肠癌(CAC)是由慢性肠道炎症反复发作引起的结肠恶性疾病,IL-6R/STAT3通路在结肠炎症反复发作进程中发挥关键作用。黄芪白术汤(HBD)是由黄芪和白术组成的经典处方,临床常用于治疗消化系统疾病,如消化性溃疡,结肠炎或结直肠癌。因此,本课题组拟探讨黄芪白术汤干预CAC的病理进程是否与抑制IL-6R/STAT3通路有关。方法:采用C57BL/6小鼠一次性腹腔注射AOM,结合3%DSS自由饮用三个循环造模,建立CAC小鼠模型,并使用黄芪白术汤干预。通过Western-blot检测IL-6R/STAT3通路相关蛋白 GP130、STAT3、p-STAT3、IL-6R、Cyclin D1 以及 Survivin 蛋白的表达,使用免疫组化法分析ki-67、Jak2、p-STAT3的表达位置以及表达水平,使用荧光定量PCR分析炎症因子TNF-α、IL-1 β、IL-6mRNA的变化。体外实验中采用结肠癌细胞系HCT-116,MTT法检测黄芪、白术的单体复合物(黄芪甲苷与白术内酯Ⅱ)在12h、24h及48h对HCT-116细胞增殖的影响。Western-blot分析经IL-6刺激后HCT-116、RAW264.7细胞IL-6R/STAT3通路相关蛋白及黄芪甲苷+白术内酯Ⅱ对其的影响。结果:CAC小鼠造模过程中出现精神萎靡不振,食量减少,体重减轻,便血、腹泻等症状。造模结束后,与正常组相比,模型组小鼠的体重明显减轻;黄芪白术汤低剂量(HBL)、高剂量(HBH)以及柳氮磺吡啶(SASP)组干预后,均明显提高CAC小鼠的存活率;模型组小鼠结肠的质量/长度值明显高于正常组(P<0.01);相比于模型组,HBL组质量/长度值降低(P<0.01);SASP组质量/长度值降低(P<0.05);模型组小鼠结肠肿瘤平均大小及数量明显上升,而HBL组和SASP组数值显著降低(P<0.05)。CAC模型小鼠结肠组织病理学观察显示,结肠粘膜腺体排列紊乱,杯状细胞明显减少,粘膜及粘膜下层出现不同程度的炎细胞浸润,部分区域粘膜出现中、重度异型增生(以结肠远端多见);而药物干预组均可不同程度抑制结肠粘膜异型增生的程度和黏膜中炎性细胞浸润的程度,可明显减轻由AOM/DSS引起的症状。Western-blot结果显示,与正常组比:模型组小鼠结肠 STAT3、p-stat3、IL-6Rα、gp130、survivin、cyclin D1 蛋白表达均明显升高(P<0.05);HBL、HBH和SASP干预后,小鼠结肠STAT3、p-Stat3、IL-6R α、gp130、survivin、cyclin D1蛋白表达明显降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,与正常组比较,模型组小鼠ki-67表达明显上升(P<0.01),而HBL干预可显著抑制ki-67的表达(P<0.05),且HBL与SASP组p-stat3、Jak2的表达水平也明显降低(P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,模型小鼠结肠中TNF-α和IL-1 β mRNA含量显著上升(P<0.01),经HBL、HBH和SASP干预后,IL-1 β mRNA含量又明显降低(P<0.05);TNF-α mRNA 含量经 HBL 和 SASP 干预后也明显降低(P<0.05)。IL-6 mRNA含量在各组小鼠中无明显变化(P>0.05)。体外实验结果显示,黄芪甲苷+白术内酯Ⅱ复合物能够抑制HCT-116的增殖,且抑制程度呈时间-浓度相关性。此外,黄芪甲苷+白术内酯Ⅱ显著抑制了由IL-6刺激诱导的IL-6R、STAT3、Cyclin D1和Survivin蛋白在HCT-116和RAW 264.7中的表达。结论:黄芪白术汤通过下调CAC病理进程中IL-6R/STAT3通路蛋白的表达,抑制炎症和肿瘤细胞增殖,进而干预CAC的发生与发展,为临床防治CAC的用药提供了一定的实验依据。