TET（Ten-Eleven-Translocation）蛋白是一种Fe2+和α-酮戊二酸依赖的双加氧酶，具有催化5-甲基胞嘧啶转化为5-羟甲基胞嘧啶的功能。TET蛋白通过调节基因组中5-甲基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的含量，从而影响基因表达调控、印记基因的发生和肿瘤的形成。目前人们在TET的研究中发现3种具有催化5-甲基胞嘧啶羟基化保守活性区域的蛋白，分别称为TET1，TET2，TET3。我们通过PCR方法从人和斑马鱼基因组cDNA文库中扩增出了4种TET蛋白家族成员保守区域基因片段，将其克隆到pET28b表达载体上，通过点突变方法对目的基因进行初步的密码子优化。我们根据TET蛋白家族成员保守区域特点，在优化密码子突变体基础上构建了16种TET蛋白突变体，通过改变诱导培养条件，构建SUMO和TET突变体融合蛋白，构建trigger factor与TET共表达体系，摸索出TET蛋白表达及可溶性最佳条件。我们对于以包涵体形式存在的TET突变体蛋白沉淀用尿素等强变性剂溶解，通过镍螯合柱亲和层析方法获得8种变性TET突变体蛋白，用自己配制的96种不同蛋白复性溶液，对变性TET突变体蛋白进行复性，利用圆二色谱仪和荧光光谱仪分别表征复性后的TET突变体蛋白的结构性质。本课题研究发现密码子优化后的TET突变体在大肠杆菌中表达量增加，大肠杆菌表达得到的TET突变体蛋白几乎以包涵体形式存在。融合蛋白SUMO及分子伴侣trigger factor能够提高部分TET突变体蛋白可溶性。通过复性溶液的筛选，得到了3种TET突变体蛋白最佳复性溶液。这种获得可溶性TET突变体蛋白的途径，将有助于TET蛋白结构与功能的深入研究。