EGFR单抗偶联微管蛋白抑制剂对人肺癌抑制作用的体外研究

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目的:本实验拟从体外研究EGFR单抗偶联微管蛋白抑制剂(简称抗体药物偶联物、ADC)对人肺癌A549细胞的抑制作用及作用的细胞周期。方法:1、细胞抑制率:运用CCK-8法检测EGFR单抗偶联微管蛋白抑制剂(ADC)、西妥昔单抗、顺铂在不同浓度不同时间对人肺癌A549细胞的体外抑制作用。2、细胞周期检测:A549细胞在EGFR单抗偶联微管蛋白抑制剂(ADC)、西妥昔单抗、顺铂不同浓度药物作用24小时后,使用流式细胞仪检测细胞周期。结果:1、细胞抑制率结果:ADC组在低、中、高浓度对A549细胞均有明显抑制作用,西妥昔单抗组对A549细胞有一定抑制作用。ADC与西妥昔单抗均为不同浓度时24小时细胞抑制率随着浓度增加而增加,P<0.05,有统计学意义。48小时低、中浓度抑制率随着浓度增加而增加,P<0.05。到高浓度时不随时间和剂量的增加而增加,P>0.05,无统计学意义。ADC与西妥昔单抗两药摩尔剂量接近时,两组在24、48小时比较,均为P<0.01,有显著差异。顺铂组低、中、高浓度对A549细胞均有明显抑制作用。低、中浓度时随着浓度和时间增加而增加,P<0.05;中浓度与高浓度相同时间比,随着浓度增加,P>0.05。高浓度时随着时间延长抑制率无明显增加,P>0.05。当ADC摩尔剂量约为顺铂的0.01时,24h抑制率P>0.05,无差异;48h抑制率P<0.05,ADC作用较顺铂强。提示ADC,西妥昔单抗,顺铂与对照组比较对A549细胞均有抑制作用。在一定剂量范围内ADC与西妥昔单抗、顺铂对A549细胞抑制率均随着浓度和时间的增加而增加,ADC作用明显强于西妥昔单抗。在相同摩尔浓度下ADC作用明显强于顺铂。2、细胞周期结果:ADC在不同浓度组与对照组比较,G2/M期细胞均明显增多,G1和S期细胞均较对照组减少,P<0.01,有显著差异,提示ADC为G2/M期阻滞。西妥昔单抗不同浓度以G1期细胞为主,G1、S、G2期与对照组比较均无明显差异P>0.05。顺铂组不同浓度细胞各期与对照组比较,G1期细胞明显增多,S、G2期细胞减少,P<0.05,有统计学意义,提示为G1期阻滞。相同药物不同浓度之间各期细胞比较P>0.05,提示细胞周期的阻滞时期与药物浓度无关。ADC与西妥昔单抗(两药分子量接近)相同摩尔浓度0.0134mmol/L各期比较,P<0.01,提示ADC与西妥昔单抗阻滞周期不同。ADC 0.0134mmol/L与顺铂1.33 mmol/L(ADC摩尔数约为顺铂的0.01)各期比较,P<0.01为显著差异,提示ADC与顺铂阻滞周期不同。结论:本实验的抗体药物偶联物(EGFR单抗偶联微管蛋白抑制剂)对人肺癌A549细胞生长有明显抑制作用,抑制作用要强于西妥昔单抗与顺铂。EGFR单抗偶联微管蛋白抑制剂阻滞的细胞周期为G2/M期,与西妥昔单抗与顺铂阻滞周期不同。
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