【摘 要】
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目的：探究在CD40+非小细胞肺癌细胞中膜稳定的CD40L突变体（CD40L-M）对细胞衰老的影响及其可能的调控机制。 方法：通过Western blot检测CD40L、p-p65、p65、IκBα、p53、p21、
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目的：探究在CD40+非小细胞肺癌细胞中膜稳定的CD40L突变体（CD40L-M）对细胞衰老的影响及其可能的调控机制。 方法：通过Western blot检测CD40L、p-p65、p65、IκBα、p53、p21、p-Chk2、Chk2、p-Chk1、Chk1的表达量；SA-β-gal染色检测细胞衰老；CCK-8法检测细胞增殖活性；流式细胞法检测细胞周期；MS-PCR法检测甲基化水平。 结果：过表达CD40L-M基因的细胞具有衰老特征，包括细胞增殖抑制，细胞体积增大，SA-β-gal染色活性增加以及几种细胞周期调控因子p53和p21表达水平增高。此外，CD40L-M诱导的衰老细胞中GATA4表达恢复，NF-κB信号通路被激活。机制研究分析显示CD40L-M表达触发ATM/Chk2DNA损伤反应，活化的ATM/Chk2信号通路介导细胞衰老和GATA4去甲基化。敲减GATA4逆转CD40L-M诱导的衰老并降低NF-κB活性。 结论：CD40L-M能够诱导非小细胞肺癌细胞衰老、抑制增殖和促进细胞周期阻滞。我们预测CD40L-M转基因的靶向治疗作用在肺癌中具有潜在的临床应用价值。
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