丹参素对大鼠肝星状细胞ERK1/2信号转导通路的影响

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目的观察丹参素对血小板衍生生长因子-BB (platelet derived growth factor-BB PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell HSC )增殖、Ⅰ型胶原合成、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(Phosphorylated extracellular signal- regulated kinase 1/2 ,P-ERK1/2)表达的影响,探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制。方法1.采用改良的胶原酶-链霉蛋白酶消化法分离大鼠HSC,α-SMA免疫细胞化学染色鉴定分离的HSC;2.MTT比色法检测丹参素对PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖活性影响;3.免疫细胞化学染色法测定丹参素对PDGF-BB刺激的大鼠HSCⅠ型胶原合成的影响;4.Western blot测定丹参素对PDGF-BB刺激的大鼠肝星状细胞P-ERK1/2表达影响。结果1.原代分离的HSC得率为3.5×10~7/鼠左右,存活率大于98%,传一代的HSC纯度大于99%;2.与空白对照组比较PDGF-BB刺激组HSC增殖明显增强(P<0.01),丹参素可抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖(P<0.05),随丹参素作用浓度的增加抑制作用增强(P<0.01);3. PDGF-BB刺激组HSCⅠ型胶原合成增强(P<0.01),丹参素可抑制PDGF-BB诱导的大鼠HSCⅠ型胶原合成(P<0.05),随丹参素作用浓度的增加抑制作用增强(P<0.01);4. PDGF-BB刺激组大鼠肝星状细胞P-ERK1/2明显表达,不同浓度的丹参素组均能明显抑制PDGF-BB刺激大鼠肝星状细胞P-ERK1/2表达,随丹参素作用浓度的增加抑制作用增强。结论1.原代分离的大鼠HSC经过鉴定具有活化HSC的生物学特性,是体外研究肝纤维化的重要模型。2.丹参素可抑制PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原合成,其机制可能与抑制ERK1/2信号转导通路有关。
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