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板栗疫病是一个世界性的病害问题,防治较困难。由于板栗疫病菌和低毒病毒相互作用的独特关系,各国研究者都试图将低毒病毒应用于对板栗疫病进行生物防治。由于板栗疫病菌菌株间存在着营养体不亲和性阻碍低毒病毒的水平传播,因此,不解决不同菌株间菌丝相互融合的难题,就无法直接利用低毒病毒进行生物防治。
本论文采集到来自广西隆安、巴马、资源、灵川和桂林市林科所的8个板栗疫病菌菌株,对这8个菌株及来自美国的2个板栗疫病菌菌株的不亲和性、营养体亲和群的多样性、5个不亲和性基因的结构差异和不亲和性基因的分子系统学进行了研究,并通过基因敲除,尝试人工改造板栗疫病菌营养体不亲和性的可行性。研究结果表明:10个板栗疫病菌菌株可区分为9个营养体亲和群,其中广西的8个菌株可区分为8个营养体亲和群,平均每个营养体亲和群包含有1个菌株,比国内其他地区板栗疫病菌营养体亲和群比例高(国内其他地区的比例为1:1.30~1.87),表明广西板栗疫病菌的营养体亲和群具有高度的多样性;对各菌株的营养体不亲和性基因进行扩增和测序,并构建了各个不亲和性基因的分子进化树,结果显示在扩增出的5个不亲和性基因中,het-d基因和het-e基因的分子进化树能较好地反映出菌株间的亲缘关系,而其余4个基因的分子进化树对反映菌株亲缘关系的作用不明显:通过同源双交换敲除了营养体不亲和性基因het-6,结果表明,该基因的缺失使得板栗疫病菌营养体不亲和性有所增强,但对菌株的色素形成和产孢未见有影响。可见,het-6基因可调控板栗疫病菌的营养体不亲和性,但该基因的缺失不能完全改变板栗疫病菌菌株的营养体亲和性,说明板栗疫病菌营养体亲和性可能是由若干个或者全部的营养体不亲和性基因发挥的作用累加的结果。