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目的：探讨FW-04-806协同Ganetespib体外抑制人类白血病细胞增殖及诱导凋亡的作用机制。
方法：（1）四甲基偶氮唑蓝（MTT）法体外检测Ganetespib单药、FW-04-806单药及其联用对急性髓系白血病（AML）细胞株HL-60、Bcr-Abl+慢性髓系白血病（CML）细胞株K562和耐Imatinib的K562/G01的增殖抑制作用；（2）ComPusyn软件探究FW-04-806联合Ganetespib的协同作用；（3）Western Blot法检测Ganetespib单药、FW-04-806单药及其联合用药对人类白血病细胞的相关热休克蛋白因子、PI3K-AKT-mTOR和Ras-Raf-MAPK等信号通路相关蛋白活性的影响；（4）通过FITC/PI双染法检测Ganetespib单药、FW-04-806单药及其联合用药诱导人类白血病细胞凋亡的作用；（5）通过免疫共沉淀法研究Ganetespib单药、FW-04-806单药对CDC37和HSP90蛋白、Bcr-Abl和HSP90相互作用的影响。
结果：（1）Ganetespib、FW-04-806呈剂量依赖性抑制人类白血病细胞HL-60、K562和K562/G01增殖，Ganetespib对HL-60和K562细胞增殖抑制率比K562/G01细胞更强，对应的IC50分别为0.06137μmol/L、0.04148μmol/L、0.2078μmol/L；FW-04-806对HL-60、K562和K562/G01细胞增殖抑制率相当，对应的IC50为：20.93μmol/L、28.86μmol/L、27.11μmol/L；（2）Ganetespib、FW-04-806单药有效阻断PI3K-AKT-mTOR和Ras-Raf-MAPK等信号通路相关蛋白；（3）FW-04-806联合Ganetespib抑制人类白血病细胞HL-60、K562、K562/G01增殖有很好的协同作用；（4）FW-04-806协同Ganetespib双重阻断PI3K-AKT-mTOR和Ras-Raf-MAPK等信号通路，且作用比单独用药效果更好；（5）Ganetespib、FW-04-806单药作用于慢性髓系白血病细胞K562，对HSP90表达几乎没有影响，HSP70表达均增加，HSP27在Ganetespib作用下，表达水平增高，而FW-04-806却能够抑制HSP27表达；（6）FW-04-806协同Ganetespib促进细胞凋亡比单药更明显；（7）免疫共沉淀结果显示，与Ganetespib不同，FW-04-806作用于Bcr-Abl+慢性髓系白血病细胞K562，通过引起HSP90/CDC37复合物解离，使得HSP90与Bcr-Abl的结合减少。
结论：Ganetespib、FW-04-806对人类白血病细胞具有良好的体外增殖抑制作用；FW-04-806协同小剂量的Ganetespib，减轻Ganetespib毒副作用的同时，与单药组相比，联合用药通过不同的作用方式，增强了对HSP90的影响，对Bcr-Abl蛋白、PI3K-AKT-mTOR和Ras-Raf-MAPK两条增殖信号转导通路相关蛋白的抑制作用以及诱导细胞凋亡作用更加明显；Ganetespib、FW-04-806单药或者联合用药通过抑制Bcr-Abl表达、双重阻断增殖信号通路、诱导细胞凋亡等方式，抑制K562/G01增殖，能够逆转K562/G01对Imatinib的耐药性；FW-04-806联合Ganetespib协同抗肿瘤作用机制研究为治疗人类白血病联合用药提供了理论基础和实验依据。
方法：（1）四甲基偶氮唑蓝（MTT）法体外检测Ganetespib单药、FW-04-806单药及其联用对急性髓系白血病（AML）细胞株HL-60、Bcr-Abl+慢性髓系白血病（CML）细胞株K562和耐Imatinib的K562/G01的增殖抑制作用；（2）ComPusyn软件探究FW-04-806联合Ganetespib的协同作用；（3）Western Blot法检测Ganetespib单药、FW-04-806单药及其联合用药对人类白血病细胞的相关热休克蛋白因子、PI3K-AKT-mTOR和Ras-Raf-MAPK等信号通路相关蛋白活性的影响；（4）通过FITC/PI双染法检测Ganetespib单药、FW-04-806单药及其联合用药诱导人类白血病细胞凋亡的作用；（5）通过免疫共沉淀法研究Ganetespib单药、FW-04-806单药对CDC37和HSP90蛋白、Bcr-Abl和HSP90相互作用的影响。
结果：（1）Ganetespib、FW-04-806呈剂量依赖性抑制人类白血病细胞HL-60、K562和K562/G01增殖，Ganetespib对HL-60和K562细胞增殖抑制率比K562/G01细胞更强，对应的IC50分别为0.06137μmol/L、0.04148μmol/L、0.2078μmol/L；FW-04-806对HL-60、K562和K562/G01细胞增殖抑制率相当，对应的IC50为：20.93μmol/L、28.86μmol/L、27.11μmol/L；（2）Ganetespib、FW-04-806单药有效阻断PI3K-AKT-mTOR和Ras-Raf-MAPK等信号通路相关蛋白；（3）FW-04-806联合Ganetespib抑制人类白血病细胞HL-60、K562、K562/G01增殖有很好的协同作用；（4）FW-04-806协同Ganetespib双重阻断PI3K-AKT-mTOR和Ras-Raf-MAPK等信号通路，且作用比单独用药效果更好；（5）Ganetespib、FW-04-806单药作用于慢性髓系白血病细胞K562，对HSP90表达几乎没有影响，HSP70表达均增加，HSP27在Ganetespib作用下，表达水平增高，而FW-04-806却能够抑制HSP27表达；（6）FW-04-806协同Ganetespib促进细胞凋亡比单药更明显；（7）免疫共沉淀结果显示，与Ganetespib不同，FW-04-806作用于Bcr-Abl+慢性髓系白血病细胞K562，通过引起HSP90/CDC37复合物解离，使得HSP90与Bcr-Abl的结合减少。
结论：Ganetespib、FW-04-806对人类白血病细胞具有良好的体外增殖抑制作用；FW-04-806协同小剂量的Ganetespib，减轻Ganetespib毒副作用的同时，与单药组相比，联合用药通过不同的作用方式，增强了对HSP90的影响，对Bcr-Abl蛋白、PI3K-AKT-mTOR和Ras-Raf-MAPK两条增殖信号转导通路相关蛋白的抑制作用以及诱导细胞凋亡作用更加明显；Ganetespib、FW-04-806单药或者联合用药通过抑制Bcr-Abl表达、双重阻断增殖信号通路、诱导细胞凋亡等方式，抑制K562/G01增殖，能够逆转K562/G01对Imatinib的耐药性；FW-04-806联合Ganetespib协同抗肿瘤作用机制研究为治疗人类白血病联合用药提供了理论基础和实验依据。