背景及意义急性心肌梗死(AMI)是急性、持续性缺血、缺氧所引起的心肌坏死,心肌梗死后心肌组织缺血缺氧以及室壁张力增加等改变可诱导炎症反应的形成。炎症因子的异常增多将促进胶原纤维过量积聚、浓度显著升高或成分发生改变,有研究表明,炎症反应在心肌纤维化的发生发展中起着十分重要作用,但是,目前对于炎症反应导致心肌纤维化的确切机制尚不十分明确。上皮间质转化(epithelial- mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞在特定的环境下丧失其相互之间的紧密连接、失去极性而转化为具有间质表型细胞的生物学过程,成体中,EMT与损伤修复、组织再生和器官纤维化过程中成纤维细胞的形成密切相关。其中,与损伤修复、组织再生和器官纤维化相关的EMT被定义为2型EMT,该类型EMT作为损伤相关事件的重要组成部分,主要生物学作用是产生成纤维细胞以修复由创伤和炎性反应造成的组织损伤。在炎性反应持续活化的情况下,EMT过程持续存在,最终造成器官纤维化。在EMT过程中,转录因子Snail和E-钙黏蛋白是十分重要的生物标志物,Snail作为多条信号通路共同的下游靶向广泛参与发育、肿瘤和纤维化过程,E钙黏蛋白的下调表达作为EMT的生物标志物广泛应用于各类型EMT的研究工作,同时,E钙黏蛋白的丢失也进一步促进EMT的进展。目前,对于EMT的研究主要在肾脏纤维化、肺纤维化以及肿瘤转移等方向,心肌纤维化过程中是否有EMT参与的相关研究尚不充分。他汀类药物为3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂,是目前临床中广泛使用的抗动脉粥样硬化基础用药。大家普遍认为强效降低LDL-C是他汀获益的基础,但随着人们对他汀类药物的深入研究,发现他汀类药物在降低胆固醇的同时,还具有多种独立于其降脂作用的效果,即他汀的多效性。大量研究提示,他汀的多效性的机制与其降脂作用无关联性,因为人们发现,在他汀发挥降脂作用之前,其多效性已经产生,包括改善内皮功能、抗炎、抗血小板、稳定动脉粥样硬化斑块、抗心律失常等。本课题拟以心肌梗死大鼠为模型,研究大鼠心梗后炎症反应、心肌纤维化的情况以及EMT生物标志物的变化,评价强化他汀治疗对心梗大鼠炎症反应和心肌纤维化的影响。方法24只SD大鼠随机分为3组(强化他汀组、普通剂量他汀组、心梗对照组各8只),另设假手术组8只。结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型。强化他汀组于术前3天开始,予阿托伐他汀50mg·kg-1·d-1与蒸馏水混悬液1.5ml灌胃,普通剂量组予以20 mg·kg~-1·d~-1与蒸馏水混悬液1.5ml灌胃,其余两组予等量蒸馏水灌胃,持续至术后4周。(1)实验第一部分:各组大鼠于术前3天(用药之前)以及术后第4周最后一天通过毛细玻璃管采集眼底静脉丛静脉血,分离血清后以化学发光法测白介素-6(IL-6)、以免疫荧光法测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。(2)实验第二部分:各组大鼠于术后第4周取血后处死,留取左心室(梗死区和梗死周边区),通过HE染色了解心肌梗死情况,通过masson染色了解心肌纤维化程度,通过免疫荧光检测E钙黏蛋白及免疫组化检测Snail的表达情况。结果(1)炎症因子IL-6和TNF-α在术前各组之间两两比较均无差异,对照组术后炎症因子较假手术组明显增高,阿托伐他汀治疗对心梗后炎症反应有抑制作用,且大剂量较普通剂量相比,对炎症反应的抑制更加明显。(2)HE染色中,强化他汀组、普通剂量他汀组及心梗对照组梗死区明显;masson染色中强化他汀组、普通剂量他汀组及心梗对照组均可见纤维增生,对照组纤维增生明显,阿托伐他汀治疗对心梗后心肌纤维化有抑制作用,且大剂量较普通剂量相比,对纤维化的抑制更加明显;在E钙黏蛋白的免疫荧光检测中,心外膜上强化他汀组可见弱阳性表达,普通剂量他汀组表达较强化组弱,心梗对照组无表达,假手术组可见阳性表达;在对Snail的免疫组化检测中,梗死区及梗死周边区强化他汀组可见少量阳性表达细胞,普通剂量他汀组见中等量阳性表达细胞,心梗对照组可见大量阳性表达细胞,假手术组未见表达。结论(1)心肌梗死后有一个明显的炎症过程,阿托伐他汀治疗可明显减轻炎症反应,且大剂量较普通剂量治疗相比,对炎症反应的抑制更加明显。(2)心肌梗死后出现明显的心肌纤维化,EMT可能参与了此过程,阿托伐他汀具有抑制心梗后心肌纤维化的作用,且大剂量较普通剂量治疗相比,对纤维化的抑制更加明显。