研究背景：　　阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统(CNS)变性的神经退行性疾病，是老年人最常见的痴呆的类型，AD的病因甚为复杂，有基因学说、胆碱能学说、自由基学说、胆固醇代谢障碍学说、内分泌失调学说等，多因异质是其病因学的基本特点。各种假说虽有其合理的一面，但均有其局限性，不能全面解释AD复杂、广泛的神经系统病理变化。但有两点是值得肯定的，一是AD的发病与机体衰老有关，二是遗传因素在多数AD发病中是重要因素。在病理机转方面，确认老年斑(SPs)和神经原纤维缠结是其主要病理变化，SPs的主要成分是β-淀粉样蛋白(Aβ)，该物质被认为是AD最可能的病理原因。近年来，β-淀粉样蛋白学说已成为比较公认研究的热点，许多研究表明Aβ是在机体衰老基础上产生的结果，同时正是由于Aβ在脑内的大量聚集而导致AD发生，以上多种学说都认为Aβ的生成与清除失衡是导致神经元变性和痴呆发生的起始因素，家族性AD的三种基因突变均可导致Aβ的过度生成是该学说的有力佐证。而Down综合症患者因体内多了一个APP基因，在早年就出现Aβ沉积斑块，也从侧面证明了该学说。　　AD，目前没有明确的实验诊断性测试方法预报，只有在死后，通过显微检查来显示脑部特征性的斑块和缠结的存在，才能完全准确地确定阿尔兹海默病，如果能发现AD活体的与发病及病理机转直接相关的生物标志物，将对AD这一普遍的神经退行性疾病的临床试验诊断及治疗的效率产生重要的影响。　　半乳糖凝集素(Galectin)对β-半乳糖具有高度亲和力和固有的序列识别特征，换言之，半乳糖凝集素与半乳糖特异性结合后形成Aβ，Aβ形成的多少和清除的快慢决定脑内Aβ沉积的轻重，从而影响AD的轻重程度及进展速度，而Aβ的体内含量具有难以测定的缺点，所以有很多研究项目进行半乳糖凝集素的测定，探索其含量与疾病的关系，以期检测Galectin与疾病之间的关联，Galectin-3(Gal-3)是半乳凝素家族的一员，它的特点是序列中包含碳水化合物（糖）识别域(CRD)，有对β-半乳糖苷残基的特殊亲和性，对β-半乳糖具有高度亲和力和固有的序列识别特征，而Galectin-3在许多研究中证明与Aβ沉积有一定相关性，本研究通过检测血清Gal-3水平，探讨其与AD发病及病情变化的内在联系，探讨Gal-3作为检测AD发病及疗效的生物标志物的可行性。　　阿尔茨海默病是一种进行性加重的神经变性的退行性疾病，临床表现为以记忆为主的多种认知功能障碍和日常生活活动能力的进行性衰退，同时可伴有多种精神行为症状。AD早期的认知功能障碍可影响患者的ADL能力。学术界目前仍认为功能衰退不可逆，AD的治疗缺乏特异性有效手段，无论是对于临床症状的缓解还是延缓进展的干预都无明确的有效药物，早中期AD患者的记忆、执行等认知功能受损程度各不相同不均衡，损害不明显的认知功能和尚保留的学习能力使早中期AD患者的认知训练成为可能。目前关于AD的认知训练治疗的临床疗效研究不多，尚待确证。AD的治疗康复重点是认知功能障碍的训练，我们采用单盲（评定者）随机对照研究，评价认知训练对早中期AD患者的认知、精神行为症状及ADL能力的影响，并与轻度认知功能障碍的患者比较，观察在改善AD症状、延缓发展方面取得的疗效。　　目的：　　通过检测血清Gal-3水平，探讨其与AD发病及病情变化的内在联系，探讨Gal-3作为检测AD发病及疗效的生物标志物的可行性;观察康复治疗训练方法是否可以稳定和改善早、中期AD患者的认知功能、言语功能和精神行为症状，评估认知功能减退的早、中期AD患者康复疗效。　　方法：　　1、基础研究　　选择2011年1月-2012年12月在烟台毓璜顶医院和山东大学齐鲁医院的神经内科和康复医学科病房和门诊患者，41例AD患者、32例MCI患者和46名健康老年人对照组患者，运用标准公认的简易精神状态检查(MMSE)方法来评估患者认知功能障碍的程度，所有入选者留取的血清样本在-80℃冷冻直至统一检测。血清Gal-3水平测量是利用特定的酶联免疫吸附测定试剂盒测定，简而言之，100毫升的血清加入到涂有Gal-3抗体的聚苯乙烯96孔板，室温培育2小时，洗涤3次后，孔板用二次抗体过氧化物酶结合辣根室温培育2小时，然后，再次洗过的孔板加四甲基联苯胺并在室温培育30分钟，最后用硫酸终止反应并在450 nm测定吸光度，用标准曲线计算评估血清Gal-3水平。　　所有的统计分析采用SPSS统计分析软件包分析。AD患者和对照组之间血清Gal-3水平计量比较用单因素方差分析（ANOVA），数据表示为平均数±标准差(SD)，P＜0.05为有统计学意义。年龄，MMSE评分和血清Gal-3水平的不同组间差异比较用双变量相关分析方法（泊松分布/皮尔森相关）进行分析，两组之间的差异在正态分布情况下使用双侧t检验评估，两组之间的差异在非正态分布情况下采用Mann-Whitney U检验评估。两组之间的性别差异采用卡方检验(Chi-square test)评估。所有患者和健康对照组MMSE评分（如认知障碍持续状态的测量）和血清Gal-3水平进行相关分析（直线相关分析法），r是正值表示正相关，r是负值表示负相关，|r|愈接近1自变量X和因变量Y的关系愈密切，P＜0.01为有显著相关性。　　2、临床研究　　选择2011年1月-2012年12月在烟台毓璜顶医院和山东大学齐鲁医院的神经内科和康复医学科病房和门诊患者，41例AD患者、32例MCI患者，所有入组AD患者达到《国际疾病分类标准》（第十版）、《精神疾病诊断和统计手册》（第三版）和国家神经病学及交流障碍和阿尔茨海默病相关疾病协会对该疾病的标准，MCI病人达到前面列举资料描述的相关标准。　　评定:治疗前和治疗12周后（研究结束后1周内），由一位对随机和治疗计划不知情的医师对入选患者进行评价。①认知能力的检测:MMSE用于评定总体认知功能，满分为30分。MMSE是目前国内外应用最广泛、最具有影响力的认知障碍筛查工具，具有良好的信度和效度。②日常生活活动能力ADL能力评定:采用张明园等编制的、用于痴呆流行病学调查的ADL量表，评定患者ADL能力，包括躯体生活自理能力和使用工具的能力，总分＞20分即有不同程度的能力下降，分数越低说明生活能力越好。　　康复治疗方法:根据患者的功能障碍情况，依据评定结果设计个体化训练方案。从日常生活活动或休闲活动中有针对性地选取一些项目，对患者进行为期12周的训练，由康复治疗师每天对患者进行一对一训练，认知功能训练，言语功能训练，同时了解、检查和指导患者的自我训练情况，要求训练内容贯彻在患者的的衣食住行中。日常生活活动训练的主要内容为更衣、饮食、用厕、出行等自理能力，洗衣、清洁等简单家务;认知功能的训练，着重思维训练与记忆力训练，也包括注意力、计算力、判断力、定向力等的训练及语言功能训练等，记忆训练方法有复述、视意象、语义细加工、首词记忆法、PQRST法、建立活动常规及有序的环境、使用辅助器具以代偿帮助患者记忆、环境调整、反应时训练、注意分配训练、思维训练及物理治疗如各种有氧运动如打太极、游泳、慢跑等，并利用游戏活动、手工等趣味性训练。原则上尽量让患者独自完成各种任务，如果患者能独自完成指定任务，再要求患者尽量缩短完成任务的时间。每周5天，每天2次，每次30分钟，统计学分析:运用SPSS统计软件进行统计分析，根据数据特点，2组患者治疗前、后组间比较，符合正态分布采用独立样本t检验，不符合正态分布的数据采用Mann-Whitney U检验法。P＜0.05为差异有统计学意义。　　结果：　　1、基础研究　　针对年龄差距作为正常对照组和AD患者之间的一个因素，用年龄作为协变量行方差分析，我们发现3个不同的组之间的血清水平有明显差异（P=0.005），以[平均数±标准差(SD)]表示，AD患者6.42±2.51 ng/mL，健康对照组5.27±1.91 ng/mL，MCI患者5.48±2.89 ng/mL，两两比较独立的t检验显示AD患者和对照组之间的血清Gal-3水平有显著差异(P=0.017，)，然而，MCI患者和健康对照组之间无显著性差异（P=0.143），AD和MCI患者之间也无显著性差异(P=0.688)。所有患者和健康对照组MMSE评分（如认知障碍持续状态的测量）和血清Gal-3水平呈显著正相关性(r=0.341，P＜0.001）　　2、临床研究　　治疗12周后，AD组的MMSE和ADL总分与治疗前比较，差异具有统计学意义(P＜0.05);治疗后两组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，见表2。　　结论：　　阿尔茨海默病(AD)是一种中枢神经系统的退行性疾病，半乳糖凝集素-3(Galectin-3/Gal-3)具有特定的保守的糖类序列识别功能的最重要特征，在研究中，我们发现实验对照组AD患者血清Gal-3水平显著增加(P=0.017)，轻度认知障碍(MCI)患者和健康对照组之间无显著差异(P=0.143)，并且AD患者和MCI患者间无明显差异(P=0.688)。对所有观察组和健康对照组患者，通过细微精神状态检查量表评测得分，发现认知障碍的程度与Gal-3血清水平有显著相关性。这些数据表明，Gal-3可能在AD的神经病学发病机理方面起重要作用，血清中Gal-3含量水平可能是一个潜在的AD诊断的候选生物标志物。　　Gal-3是一种在各种生物过程包括纤维化、血管生成、细胞凋亡、免疫激活等过程中有重要关联的多功能的蛋白质，而所有这些都与AD的发生发展有关，我们研究了血清Gal-3水平与AD的临床症状表现的相关性，本研究报告值得关注的主要发现是AD患者的血清中Gal-3存在水平明显增加，此外，发现MMSE评分与血清Gal-3水平有极显著的正相关关系。据我们所知，目前的数据确定升高的Gal-3水平与AD相关，Gal-3在中枢神经系统功能作用已有报道，Gal-3已经被报道在许多脑部疾病包括缺血性脑损伤、肌萎缩侧索硬化和朊病毒病/朊蛋白病的病理过程中发挥诱导作用，Gal-3在大多数类型的细胞中表达，它不仅是在细胞质和细胞核中，而且在细胞外空间，重要的是，它已经在中枢神经系统和周围神经系统中的星形胶质细胞、巨噬细胞/小神经胶质细胞、内皮细胞、雪旺细胞被识别出来，而小神经胶质细胞和内皮细胞的激活与AD发病机理相关，此外，Gal-3参与了几乎所有种类的免疫细胞生理机能，因此，我们推测，Gal-3的表达上调与AD的免疫激活和调节相关，然而，目前所知Gal-3的表达调控机制的研究数据很少，需要进一步的研究来阐明其基本机制Gal-3在AD的发病机理中其蛋白质生物学作用机制据推测可能有几个方面，例如，Gal-3影响凋亡细胞死亡过程;细胞内Gal-3抗凋亡和细胞外的Gal-3促凋亡。此外有报道Gal-3在炎症过程中发挥重要的作用。有人提出Gal-3通过抑制抗炎细胞因子白细胞介素10(IL-10)的产生而导致炎症反应增强。需要注意的是，IL-10已被建议作为AD的进展过程中的小胶质细胞释放的神经保护因子。有研究报道Gal-3抑制周围神经轴突损伤手术后神经再生并加重实验性变应性脑炎的中枢神经系统损伤。Gal-3是细胞表面的晚期糖基化终末产物的重要受体，晚期糖基化终末产物(AGEs)的积累及AGEs与细胞受体互相影响被认为是慢性疾病如糖尿病、AD、尿毒症和老化的并发症长期发展的关键因素。　　升高的血清Gal-3水平暗示AD患者发生脑神经的凋亡激活、炎症和受损的神经退行性疾病，更重要的是，我们还发现，在所有患者和健康对照组之间其血清Gal-3水平和认知状态之间的相关性，鉴于其分泌性和血清中的水平可检测到，该项目作为AD患者的一个潜在的生物标志物的前瞻性研究，其初步结论值得在未来的临床试验进一步评估研究。　　本研究结果显示，AD患者及MCI患者经认知训练后，其MMSE和ADL分数均明显改善，因此可认为康复治疗功能训练可以改善早中期AD患者的认知功能和精神行为症状。研究中患者经治疗后ADL能力显著改善，考虑可能与我们设计选择的康复训练任务内容的针对性强有关。　　老年人MCI是以轻度记忆和/或某项认知功能障碍为主要表现，但不足以诊断AD或痴呆的一种认知损害状态，以往研究发现，MCI人群具有异质性，部分转化为AD，部分转化为其他类型痴呆，也有部分病人病情长期保持稳定。刘敏等对MCI患者进行规范的、个体化的认知功能康复洲练，内容包括注意力、计算力训练、内、外辅助法记忆功能训练等，治疗2个月后与治疗前比较在各项记忆任务七均有显著性提高，说明早期认知康复训练对MCI记忆功能的改善是非常有效的。作为正常老年人向痴呆转化的过渡阶段MCI被认为是可以干预治疗的时期，因此，对于MCI早期给予康复训练治疗有助于预防发展成AD和其他类型痴呆。　　由于AD的中枢神经退行性变不可逆转，对于AD的治疗难度很大，我们虽然在研究中取得一些可喜成绩，但应该考虑到以下不足:研究中样本量较少，选取认知功能障碍程度及脑器质性变程度较轻者，多个治疗师系统化多方面训练治疗干预，短期内家属配合程度好等有利因素，而康复治疗的大样本及长期性的持续性社区及家庭的专业人员康复治疗及患者自我调护等问题，会对患者的影响很大，需要进一步扩大研究及随访追踪观察。　　康复训练治疗方法可稳定和改善早中期AD患者的认知功能、言语功能和精神行为症状。该方法无物理疗法无毒副作用，可长期持续施行，可作为认知功能减退的早中期AD患者的一种首选治疗方法。