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目的:(1)探讨卵巢组织中HSPA5表达情况及其作为指示卵巢癌发生潜在标志物的可能性;(2)研究未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)及其诱导的自噬在环境内分泌干扰物氟他胺致雌性子鼠生殖系统损伤模型中的作用,为环境内分泌干扰物对雌(女)性生殖器官损伤研究增加一些理论基础。方法:(1)从BioGPS、Oncomine以及String数据库中提取正常人体各组织中HSPA5/GRP78基因表达数据、卵巢癌患者卵巢组织与正常人群卵巢组织HSPA5/GRP78基因表达数据以及与HSPA5蛋白相互作用的蛋白网络数据,利用生物信息学和生物统计学的方法进行统计分析。用系统评价HSPA5/GRP78基因表达与卵巢癌发生的关系,用蛋白质相互作用网络模型分析与HSPA5/GRP78相互作用的蛋白质。(2)孕12-18天以300 mg/kg·bw氟他胺灌胃ICR雌鼠,对照组给予等体积的大豆油,于子鼠出生7周后观察雌鼠外形、称体质量,取子宫和卵巢并称其质量,计算脏器指数;将小鼠子宫、卵巢组织制成切片,观察其病理学改变并对各级卵泡计数。检测雌性子鼠子宫、卵巢组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的含量,采用实时荧光定量PCR的方法检测子宫、卵巢组织中UPR、自噬、凋亡、血管生成、氧化应激和细胞周期相关基因的表达丰度,采用Western blot的方法检测子宫、卵巢组织中UPR关键蛋白的表达,探讨UPR及自噬在在子宫、卵巢组织损伤中的作用。结果:(1)BioGPS与Oncomine数据库结果显示HSPA5/GRP78在人体各种正常组织中均表达,卵巢癌组织中HSPA5/GRP78的表达水平较正常卵巢组织升高(P<0.05);String数据库结果显示HSP90B1、ERN1、DNAJC10、DNAJB1、CANX、ATF6、PDIA3、DNAJB6、DNAJB11、DNAJC7与HSPA5存在相互作用关系。(2)实验组雌性子鼠与对照组相比体质量降低(P<0.05)。(3)组织病理学检查发现子宫和卵巢发育迟缓,卵泡计数结果显示,实验组原始卵泡数量和成熟卵泡数量比对照组少(P<0.05)。(4)氟他胺组雌性子鼠子宫中GSH-Px含量以及SOD活性低于对照组,但子宫组织中的MDA含量高于对照组(均有P<0.05)。实验组卵巢中SOD活性和GSH-Px含量低于对照组(P<0.05)。(5)实验组子代雌鼠子宫中表达水平上调的包括:UPR关键基因Grp78、Perk、Ire1、eIF2α、Atf4、Xbp1;自噬相关基因Atg3、Lc3b、Akt1、Bcl-xl、Nf-κb;凋亡相关基因Ask1、Jnk1、Jnk2、Jnk3、Caspase3、Caspase9、Caspase12、Chop、Bax;氧化应激相关基因Noxo1;细胞周期相关基因Ccnd1(P<0.05)。子宫中表达下调的有Sod1;血管生成相关基因Vegfa、Hif-1α(P<0.05)。实验组卵巢中表达上调的基因有:UPR关键基因Grp78、Perk、Ire1、Atf6、Atf4、Xbp1;自噬相关基因Atg3、Akt1、Bcl-xl、Nf-κb;凋亡相关基因Ask1、Jnk3、Caspase3、Caspase9、Caspase12、Chop、Bax;氧化应激相关基因Noxo1(P<0.05);下调的有:血管生成相关基因Vegfa、Hif-1α;自噬相关基因Lc3b、Ulk1;氧化应激相关基因Gpx1(P<0.05)。实验组子宫、卵巢组织Grp78、Perk、Ire1蛋白的表达水平均高于对照组(P<0.05)。(6)String数据库预测蛋白质相互作用情况:子宫组织中差异基因互相作用显著的是Hspa5、Ddit3/Chop、Xbp1、Atf4;卵巢组织中差异基因互相作用显著的是Hspa5、Ddit3/Chop、Xbp1、Atf4、Ern1/Ire1。结论:(1)卵巢癌患者卵巢组织中HSPA5 mRNA的表达水平高于正常人卵巢组织中HSPA5 mRNA的表达水平;(2)孕期氟他胺暴露可以诱导子代雌性子鼠子宫和卵巢损伤;(3)氟他胺致雌性子鼠子宫卵巢组织损伤、卵泡储备减少可能与UPR及其诱导的自噬有关。