【摘 要】
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分别在摇瓶和5L发酵罐上对兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)发酵生产透明质酸(hyaluronic acid,HA)进行了优化研究.摇瓶试验结果表明,种子的最适种龄为8~9小时,静止
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分别在摇瓶和5L发酵罐上对兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)发酵生产透明质酸(hyaluronic acid,HA)进行了优化研究.摇瓶试验结果表明,种子的最适种龄为8~9小时,静止培养方式有利于种子培养.HA发酵的适宜温度、pH和装液量分别为37℃、7.0和20mL.酵母抽提物和蛋白胨是较合适的复合氮源,浓度分别为1％和2％.Mg<2+>对HA的生物合成具有重要作用,最适Mg<2+>浓度为0.1％.补料有利于HA的生物合成,采用4％的初始葡萄糖浓度及维持培养过程1％的糖浓度,HA的产量提高到4.0g/1.低浓度的尿嘧啶(0.05g/L)对HA的合成有一定的促进作用.5L发酵罐结果表明,分批补料发酵能明显提高HA的产量,与分批发酵相比,HA产量提高了40％.初始葡萄糖浓度对HA的产量和分子量有较大影响.较高的初始葡萄糖浓度有利于HA分子量的提高,较低的初始葡萄糖浓度可得到较高的HA产量.采用4％的初始葡萄糖浓度,通过补料维持发酵过程的葡萄糖浓度在2％左右,可使HA的产量达到3.4g/1,平均分子量在2.45×10<6>Da以上.尿苷酸有利于HA的合成,加入0.75g/l的尿苷酸,可使HA的产量提高到4.1g/l(产量提高了21.5％),分子量提高到2.87×10<6>Da.适宜的搅拌转速和通气量分别为600 r/min和2.4L/min.发酵液经过分离纯化得到了纯品HA.经过化学成分分析及红外光谱和紫外光谱表征,所得产品HA与标准品的特性一致.结果表明该文得到的HA产品具有较高的质量.
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