第一部分:精准化术后腹膜粘连动物模型的建立与评估目的:创建一种精准化的大鼠术后腹膜粘连模型并对其进行评估方法:本研究通过开腹的手术方式精准化建立大鼠腹膜粘连模型。具体手术过程为:使用无菌的10%水合氯醛,腹腔注射对大鼠进行麻醉。为避免术中大鼠出现剧烈反应,以大鼠四肢无自主运动做为麻醉满意的指标。沿大鼠腹部正中线开口4cm,依次切开皮肤,肌肉,进入腹腔。充分暴露盲肠,在盲肠盲端上方3cm处用无菌纱布刮擦盲肠40次至盲肠点状出血,刮擦面积1×2 cm~2,统计出血点个数。在盲肠相对应腹壁侧用外科手术刀片刮擦腹壁,刮擦面积1×2 cm~2。手术后第7天,过量麻醉处死大鼠,“U”型切口打开大鼠腹腔,观察腹部粘连情况及大鼠死亡率,采用粘连占比指标评估腹膜粘连的程度,即粘连占比=粘连面积/损伤面积。结果:术中盲肠出血点个数的统计结果为11.5±1.5,术后大鼠死亡率为0%,术后大鼠粘连占比均值为0.69。结论:构建的大鼠术后腹膜粘连模型具有低死亡率,并且能有效控制大鼠腹膜粘连的形成及稳定。盲肠出血点个数的稳定说明大鼠盲肠损伤程度的一致性,量化的评价指标确保了模型的精准化。第二部分:丝胶蛋白应用于预防/减少腹膜粘连的研究目的:探索丝胶蛋白在预防/减少腹膜粘连中的应用方法:本部分研究首先利用家蚕蚕茧,通过高温碱提法提取丝胶蛋白,获得丝胶蛋白溶液,将丝胶蛋白溶液应用于上述精准化大鼠术后腹膜粘连模型,并使用生理盐水和商品化医用壳聚糖作为对照。在相应时间点观察大鼠腹膜粘连情况,同时切除大鼠腹膜粘连组织,一方面通过将大鼠粘连组织标本进行固定,石蜡包埋,切片,进行H&E染色观察;另一方面对大鼠粘连组织中腹膜粘连形成起重要作用的分子(包括IL-6、PAI-1、TGF-β1)进行mRNA表达水平的检测。结果:丝胶蛋白溶液组大鼠腹膜粘连程度明显低于生理盐水组及医用壳聚糖组;丝胶蛋白溶液组大鼠腹膜粘连区域炎性程度明显低于生理盐水组及医用壳聚糖组;丝胶蛋白溶液组大鼠腹膜粘连组织中的IL-6 mRNA表达水平明显低于生理盐水组及医用壳聚糖组;丝胶蛋白溶液组大鼠腹膜粘连组织中的PAI-1 mRNA表达水平明显低于生理盐水组及医用壳聚糖组;丝胶蛋白溶液组大鼠腹膜粘连组织中的TGF-β1 mRNA表达水平明显低于生理盐水及医用壳聚糖组。结论:丝胶蛋白溶液能通过减轻腹膜损伤区域炎症反应,促进纤溶来有效预防/减少大鼠腹膜粘连的形成,可作为用于防腹膜粘连的材料。