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目的创伤导致机体出现全身炎症反应综合征,甚至发生多器官功能衰竭。全身炎症反应综合征的发病机制及防治至今仍未完全了解。现已知创伤后机体可产生大量的mtDNA,而mtDNA可激活P38蛋白激酶通路产生炎症因子,导致全身炎症综合征,但是mtDNA否能通过TLR-9激活NF-κB通路并产生炎症因子依然未知。本文采用体内试验,首先注射不同浓度MtDNA,检测外周血各种炎症因子的水平变化,观察肺脏炎性浸润情况,探讨mtDNA导致SIRS的机制;在此基础上以氯喹与PDTC为阻滞剂,初步了解氯喹与PDTC对于mtDNA导致SIRS的保护效应,为严重创伤救治中降低SIRS发生,防治多器官损伤及相关并发症提供新思路。方法第一部分将大鼠分为8组;①缓冲液组(n=2)②nDNA(10ug/ml)组(n=14)③mtDNA(15ug/ml)组(n=14)④线粒体碎片(终浓度含mtDNA1μg/ml,MTD1)组(n=14)⑤mtDNA(5ug/ml)组(n=14)⑥线粒体碎片(终浓度含mtDNA5μg/ml,MTD5)组(n=14)⑦mtDNA(15ug/ml)组(n=14)⑧线粒体碎片(终浓度含mtDNA15μg/ml,MTD15)组(n=14)。第二部分将大鼠分为4组:①mtDNA(15ug/ml)+氯喹(10mg/kg)组(n=14)②mtDNA(15ug/ml)+氯喹(30mg/kg)组(n=14)③mtDNA(15ug/ml)+PDTC(30mg/kg)组(n=14)④mtDNA(15ug/ml)+PDTC(120mg/kg)组(n=14)。两部分分别在1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时和48小时,利用多通道生理检测仪检查大鼠生命体征变化;用酶联免疫吸附试验法(ELISA)观测外周血中TNF-α、IL-10、IL-6、的表达水平;用实时定量PCR(Real-time PCR)检测肺组织中NF-κB亚单位p65mRNA、I-κBmRNA、TLR9mRNA的表达;荧光定量PCR检测外周血中mtDNA的水平;HE染色观察肝、肺、肾、肠的病理学变化。实验资料采用均数±标准误(x±s)表示。所有数据运用SPSS17.0统计软件采用单因素方差分析(one way ANoVA)及回归与相关分析, P<0.05为差异有显著性。结果1.各组之间的大鼠血压与呼吸没有明显变化,各实验组在不同时间点体温明显变化,但各组之间的体温变化没有统计学意义。2.注射缓冲液大鼠和nDNA的大鼠在各个时间点外周血炎症因子水平未见明显变化;线粒体碎片和mtDNA组在1小时炎症因子水平开始升高,8小时到达高峰,随着注射线粒体碎片和mtDNA浓度升高,炎症水平越高,且含相应mtDNA浓度的线粒体碎片比这种浓度的mtDNA炎症因子水平高。3. p65mRNA、I-κBmRNA在肺组织中的表达水平和炎症因子、TLR9的表达水平升高有线性相关性。4. p65mRNA、I-κBmRNA在肺组织中的表达水平呈现负相关。5.氯喹与PDTC浓度越高,炎症因子表达水平越低,阻滞效果越好,但是氯喹与PDTC的阻滞效果未见明显差异。结论mtDNA能通过刺激TLR9引起的NF-κB通路导致机体出现全身炎症反应综合征。氯喹和PDTC均能对mtDNA引起的SIRS起保护作用。