长期不同运动负荷对大鼠学习记忆能力及海马ST8SiaⅣ表达的影响

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目的:本实验通过建立SD大鼠长期不同运动负荷游泳模型,探讨长期不同运动负荷后对大鼠学习记忆及海马ST8SiaⅣ表达的影响。方法:48只SD大鼠随机分为对照组(C,n=16),中等负荷运动组(M,n=16),过度负荷运动组(O,n=16)。C组分为对照生化组(C1)和对照水迷宫生化组(C2)。M组分为中等负荷生化组(M1)--和中等负荷水迷宫生化组(M2)。O组分为过度负荷生化组(O1)和过度负荷水迷宫生化组(O2)。C组自然饲养,不加干预,M组和O组大鼠进行为期7周的不同负荷游泳训练。C1、M1、O1组,最后一次训练后即刻一同断头取脑。C2、M2、O2组,在进行10天水迷宫后取材,取材方式同前。Morris水迷宫法检测游泳训练对大鼠学习记忆能力的影响, HE染色、免疫组织化学、Real-time PCR和Western Blotting方法,测定海马微结构的变化和ST8SiaⅣ蛋白及基因表达。结果:1.水迷宫行为学检测结果:潜伏期时间各组均随着训练时间的延长而缩短,各组每天横向对比,均无显著性差异,纵向对比各组第一天与后九天均有非常显著性差异(P<0.01);C2、M2、O2组分别在第5天、第4天、第3天进入稳定期,潜伏期时间不再缩短。第一象限时间百分比各组均随着训练时间的延长,逐渐增加,各组从第2天开始,第一象限时间百分比出现非常显著性升高,到第五天各组均达到稳定状态。M2穿越平台次数要高于其它两组,但差异不显著。2.HE染色结果:C组和M组大鼠海马神经元排列整齐,形态完整,细胞间质均匀、致密,未见异常改变;O组大鼠海马神经元排列紊乱,有部分细胞染色加深,细胞间质疏松。3.免疫组化结果:M1组海马CA1、CA3区神经元中ST8SiaⅣ阳性表达非常显著高于C1、O1组(P<0.01);M2、O2组ST8SiaⅣ阳性表达非常显著高于C2组(P<0.01);O2组ST8SiaⅣ阳性表达显著高于M2组(P<0.05)。4. Real-time PCR ST8SiaⅣ结果:M1和O1组基因表达均高于C1组,但差异并不显著;O1组基因表达低于M1组,但差异并不显著。M2组基因表达明显高于C2组(P<0.05),O2组基因表达高于C2组,但差异并不显著;O2组基因表达低于M2组,但差异并不显著。5.ST8SiaⅣ Western blotting结果:O1组蛋白表达显著性高于C1组(P<0.05);O1组蛋白表达显著性高于M1组(P<0.05)。M2组蛋白表达显著性高于C(2P<0.05);O2组蛋白表达非常显著性高于C2组(P<0.01)。结论:1.运动组比对照组更快地形成了空间记忆能力。2.长期中等负荷运动有利于保护大鼠海马的微结构,从而促进了大鼠学习记忆能力的提高;过度负荷运动造成了大鼠海马结构的损伤,从而对学习产生了不利影响。3.长期中等负荷运动使ST8SiaⅣ表达升高,可能机制是由于ST8SiaⅣ表达的增加,进而使PSA-NCAM增加,促进海马神经元建立更多的突触联系,使学习记忆能力增加。过度负荷运动使ST8SiaⅣ表达升高,可能机制是由于ST8SiaⅣ表达的增加,使PSA-NCAM增加,修复过度负荷所致的大鼠海马神经元损伤。
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