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研究目的:采用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术评价耳针对家兔血糖的干预作用,从而确定耳针是提高胰岛素敏感性的一种方法,并阐明其干预作用的机制;为耳针治疗2型糖尿病(T2DM)提供实验依据,为临床推广应用打下基础。实验方法:1.选取健康新西兰家兔12只,随机分为清醒组和麻醉组,每组6只(n=6)。清醒组:在非麻醉状态下,行家兔双侧耳缘静脉穿刺术。麻醉组:在麻醉状态下行家兔颈动静脉插管术。两组家兔分别进行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,根据实验周期、血糖波动等因素对两种方法进行比较。2.选取健康新西兰家兔16只,随机分为对照组和耳针组,每组8只(n=8)。耳针组:模拟人体取穴,在相当于人体耳穴胰点的家兔耳甲艇处,双侧,电针治疗,疏密波,40min。对照组:除未电针外,与耳针组相同。两组家兔分别采用高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术检测葡萄糖输注率(GIR),并测定家兔空腹血糖(FBG)、钳夹实验期间血糖及稳态血糖,对家兔的胰岛素敏感性进行评估。实验结果:1.非麻醉状态下的家兔双侧耳缘静脉穿刺的高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验中家兔血糖在正常范围内波动,操作过程简单,成功率高;而麻醉状态下的家兔颈动静脉插管高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验中:家兔血糖波动较大,且不在正常范围内,操作过程复杂,成功率低。2.非麻醉状态下的家兔双侧耳缘静脉穿刺的高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验中对照组和耳针组的GIR变异系数(CVGIR)分别为1.28%、0.21%,耳针组明显低于对照组(P<0.05)。同时对照组、耳针组的空腹血糖与稳态血糖比较后差异无统计学意义(P>0.05)。3.非麻醉状态下的家兔双侧耳缘静脉穿刺的高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验中:耳针组家兔的GIR明显升高,与对照组比较差异显著(P<0.05)。耳针组与对照组家兔的GIR在各个时间点的比较:输糖后40min、50min及60min时,耳针组GIR升高,差异显著(P<0.05)。实验结论:1.在非麻醉状态下,采用家兔双侧耳缘静脉穿刺的高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,具有一定的可行性和可靠性,稳定性高、操作简便、死亡率低、重复性好。即在经典方法的基础上,成功建立家兔高胰岛素-正葡萄糖钳夹模型,突破了国内基础研究中只在小动物(大鼠及小鼠)应用的限制。2.实验过程中家兔血糖逐渐趋于稳定,钳夹实验的稳定性较好。而耳针组钳夹实验结果具有更高的稳定性。3.在输入葡萄糖后的40min、50min、60min时耳针组与对照组有明显差异,提示耳针可有效提高机体的胰岛素敏感性,增加外周组织对糖的利用率。它可能是通过改善肝脏和肌肉脂肪等外周组织对胰岛素的敏感性,提高周围组织对葡萄糖的利用率这一途径来调节机体的糖代谢,最终达到降低血糖的效果。