嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila,Ah）在自然界分布广泛,普遍存在于淡水、污水、淤泥、土壤和人类粪便中,对养殖及野生鱼、虾、蛙、甲鱼等生物常见的细菌性病原体,可通过受损伤的皮肤及伤口感染上述生物,并可进一步通过食物链感染人。此菌所致鱼类等嗜水气单胞菌病具有流行广、发病快、死亡率高等特点,常常造成养殖渔业的巨大经济损失,严重危害渔业及其它水产业的发展。目前国内外有关嗜水气单胞菌鱼病的研究多局限于病原微生物学方面,对该病的诊断主要依靠病理观察及细菌学鉴定,两种方法在准确性及检测速度上均有一定限制;防治方面主要利用抗生素或减活、灭活疫苗,安全性和有效性均不理想。鉴于此,本研究设计制备嗜水气单胞菌抗独特型单克隆抗体,为嗜水气单胞菌病检测及治疗提供新的技术方法,并为其它鱼用疫苗的研制提供参考。具体实验方法及结果如下:利用本室自制的具有免疫中和活性的抗嗜水气单胞菌单克隆抗体1G10,通过动物免疫、细胞融合、筛选和克隆化,获得4株分泌抗独特型抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1F9、1H10、3F5和4G3。杂交瘤细胞株的培养上清液及BALB/c小鼠腹水中抗独特型抗体效价范围分别为1×10^-1～1×10^-2和1×10^-4～1×10^-5。4株杂交瘤细胞系所分泌的IgG亚类是: 1F9、1H10、4G3为IgG2b;3F5为IgG3。ELISA竞争抑制实验结果显示:4株抗独特型抗体与兔抗嗜水气单胞菌多克隆抗体的结合都能被嗜水气单胞菌抑制,而且抑制百分率随着嗜水气单胞菌浓度的增加而增加,说明4株嗜水气单胞菌抗独特型单克隆抗体与嗜水气单胞菌之间存在相互竞争关系,均具有模拟嗜水气单胞菌抗原的特性。抑制百分率结果显示1F9、1H10受抑制程度比其余2株受抑制程度高,推测其模拟嗜水气单胞菌抗原的活性最好。生物学功能鉴定结果表明,制备4株嗜水气单胞菌抗独特型单克隆抗体腹水的BALB/c小鼠血清均能与嗜水气单胞菌反应,效价为1:100～1:1000,说明上述小鼠血清中含有抗嗜水气单胞菌抗体,提示4株嗜水气单胞菌抗独特型单克隆抗体均具有模拟嗜水气单胞菌抗原表位的作用,可用作预防鱼类嗜水气单胞菌病的疫苗。综上所述,本研究利用杂交瘤技术分别制备出多株抗嗜水气单胞菌的抗独特型单克隆抗体,为嗜水气单胞菌病的预防提供了条件。经检索,迄今未见嗜水气单胞菌抗独特型抗体疫苗成功制备的文献及专利报道。