活化的Cdc42相关激酶1（Activated Cdc42-associated kinase1,ACK1）,也称为TNK2,是一种非受体酪氨酸激酶（NRTK）。ACK1在细胞质和细胞核之间穿梭,以快速将细胞外信号从受体酪氨酸激酶（RTK）传递到细胞内效应子。研究发现在多种人类恶性肿瘤（如:肺癌、前列腺癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌和卵巢癌）都观察到ACK1基因扩增和突变。异常激活的ACK1不仅可以通过磷酸化不同的酪氨酸残基来促进关键的促生存激酶和受体的活化,而且还可以从癌细胞中消除肿瘤抑制因子,从而引起癌症的发生。最近,我们和其他课题组发现ACK1可通过旁路激活的方式介导非小细胞肺癌对第三代EGFR抑制剂（如奥希替尼和ASK120067）产生耐药。因此,抑制ACK1的活性可作为克服临床耐药的潜在策略。然而,目前尚无选择性ACK1抑制剂进入临床研究,所以迫切需要设计和合成具有新颖骨架以及高选择性的ACK1抑制剂。本文在已报道的ACK1抑制剂R-9b的基础上,利用分子模拟对接,分析化合物与蛋白的结合模式,通过骨架跃迁的策略,确定嘧啶并吡啶酮类化合物13为先导分子(对ACK1的IC50值达0.4 n M)。随后对化合物13进行系统的结构优化和构效关系研究,设计合成了一系列嘧啶并吡啶酮类的新型ACK1抑制剂。大多数化合物对ACK1表现较强的抑制活性(IC50值为0.3-2.1 n M),蛋白免疫印迹实验也显示代表化合物13j能显著抑制ACK1及其下游蛋白AKT的磷酸化水平,但是化合物13j激酶选择性较差。为进一步提高抑制剂的选择性,我们将ACK1蛋白与SRC蛋白叠合分析,发现ACK1具有更大的后口袋,由此设计合成了化合物13ze-13zk,其中代表性化合物13zj对ACK1抑制活性较好,IC50为2.1 n M。在对468种激酶进行筛选时,化合物13zj也表现出了较好的激酶选择性,其选择性系数S（35）、S（10）和S（1）分别为0.159、0.087和0.015。另外,当化合物13zj浓度为10μM时,对部分脱靶激酶抑制活性进行测试:CSF1R(IC50=100.8 n M),ABL(IC50=1.68μM),DDR1(IC50=1.68μM),DDR2(IC50=1.68μM),ZAK(IC50=71.2 n M),RET(IC50=27.7 n M)),PDGFRB(IC50=59.04 n M),KIT(IC50=1.23μM),SRC(IC50=218.7 n M)。初步研究显示化合物13zj可以显著抑制ACK1及其下游蛋白AKT的磷酸化水平。本论文通过合理的药物设计和结构优化策略,成功得到具有较好生物活性和药代性质的ACK1小分子抑制剂13zj,进一步的体内研究还在进行中。本课题的研究将为ACK1抑制剂的研发与克服EGFR三代抑制剂耐药提供一定的研究基础。