西罗莫司对人子宫内膜癌KLE细胞增殖及HIF-1a、mTOR基因及蛋白表达抑制作用的研究

来源 :广州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kzhengting
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究西罗莫司对体外缺氧培养的人子宫内膜癌细胞系KLE细胞增殖及HIF-1a、mTOR基因及蛋白表达的抑制效应,讨论以mTOR蛋白为作用靶点治疗子宫内膜癌可能的细胞内信号传导机制。  方法:用氯化钴诱导子宫内膜腺癌KLE细胞模拟缺氧微环境,外源性给予不同浓度的西罗莫司分别作用于细胞24小时,48小时后,采用CCK-8法检测KLE细胞活性变化。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测西罗莫司对KLE细胞HIF-1a、mTOR基因表达的影响。采用免疫荧光技术检测不同浓度西罗莫司对KLE细胞内HIF-1a、mTOR蛋白的变化。  结果:⑴西罗莫司可显著抑制缺氧条件下人子宫内膜癌 KLE细胞的增殖,其抑制率与药物浓度呈剂量依赖性关系,而且48小时比24小时存活率低;10000nmol/L西罗莫司分别作用24小时和48小时后,缺氧条件下KLE细胞的存活率分别低至12%和9%。⑵在西罗莫司的干预下,随着药物作用浓度的增加,KLE细胞中mTOR和HIF-1α mRNA和蛋白表达水平均呈下降趋势,在其浓度最大组抑制效应达到最大,实验处理组与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。⑶HIF-1α蛋白主要定位在细胞核,而mTOR蛋白在细胞质及细胞核均有分布。其中在常氧对照组中HIF-1α蛋白表达检测率较低,但在缺氧处理后 HIF-α表达显著升高且有表达聚集的现象;mTOR蛋白在缺氧对照组细胞内的表达与常氧对照组相比无明显差异;与缺氧对照组比较,缺氧加药组随着西罗莫司浓度增大,HIF-1α和mTOR蛋白表达有所减弱。  结论:在缺氧条件下,西罗莫司可能通过特性性阻断 mTOR信号转导途径降低人子宫内膜癌KLE细胞内mTOR及HIF-1a表达,抑制肿瘤细胞生长。这可能是西罗莫司治疗子宫内膜癌的机制之一。
其他文献
中国首家平价钻石上市品牌“全城热恋钻石商场”成都首家主力店于4月20日正式开业,位于成都绝对核心的天府广场富力天汇商场三层。据悉,全城热恋钻石商场首创“奢侈品快消”
【目的】探讨E-钙粘素和β-连环素的表达在恶性GTD的发生发展中的作用,以及对葡萄胎恶变预测和GTT预后评价的价值.【方法】1收集广东医学院附属医院收治的GTD病例共55例,对患
目的 通过比较良恶性胸水两组患者外周血与胸水中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)及核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)的不同表达水平,分
期刊
期刊
期刊
期刊
期刊
期刊
随着科学技术的发展,地质勘探技术越来越多的应用在建筑工程项目的设计中.但是由于我国的地质勘探技术起步比较晚,技术不是特别的成熟,目前还在摸索中前进.所以那必定会遇到
期刊