研究背景及目的经历了数十年，肺移植已经从实验研究发展到了临床应用阶段，目前已成为公认的治疗终末期肺疾病的一种有效的治疗方法。现阶段，由于免疫抑制剂的应用以及肺保存方法的不断改进，肺移植术后供肺严重功能衰竭的发生率已有了明显降低。肺移植研究早期的许多问题都已得到解决，移植的远期疗效及存活率的提高也令人鼓舞。但是尽管如此，医学工作者们还是在不断尝试各种方法希望使移植后器官的功能达到最理想的状态，这也是长期来器官移植领域中的一个难点。在肺移植中，缺血再灌注损伤是长期来导致移植后早期肺功能障碍及组织损伤的重要原因，这是由于移植后的肺对缺血再灌注损伤的不利影响非常敏感。因此，肺移植中的缺血再灌注损伤引起了广泛的关注。肺缺血再灌注损伤可以表现为肺血管阻力升高，氧合功能下降，顺应性降低以及水肿形成等等。其病理生理学机制非常复杂，包括炎性细胞因子的生成与释放，中性粒细胞、巨噬细胞的聚集与浸润，氧自由基的释放，各种蛋白酶的激活，以及一氧化氮的合成等等。抑肽酶是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，以往被广泛应用于临床以减少心脏手术围手术期的出血，对凝血、纤溶以及炎症的发展变化都有一定影响。抑肽酶可以通过抑制溶酶体酶的释放与激活，对缺血再灌注损伤表现出一定的保护作用。抑肽酶还可以抑制多形核白细胞生成与释放超氧化物和过氧化物。以往的研究表明，抑肽酶对缺血再灌注后的心肌、肝脏及肾脏有明确的保护作用。本研究中，我们通过建立同种异体犬单肺移植模型，观察抑肽酶对肺移植造成的肺的缺血再灌注损伤是否有保护作用。第四军医大学硕士学位论文方法成年雄性犬20只，体重15士2.skg，随机等分为两组，每组随机分为供体和受体各5只，建立肺移植动物模型。术式采用左单肺移植术，术中供肺平均缺血时间约为90分钟。I组(抑肤酶组):术中每只受体犬给予抑肤酶静滴(25单位/kg)，，H组(对照组):每只受体犬给予等容积5%葡萄糖溶液。恢复血流灌注1小时后，取移植肺组织为标本，检测肺组织中丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活力、一氧化氮(NO)含量以及肺含水量，并做HE染色，光镜下观察病理变化。另于每只受体犬麻醉后(T0)、移植肺恢复血流灌注后30分钟(TL)、1小时(TZ)、2小时(T3)采集动脉血。用双抗体夹心ELISA法检测血清中IL一6、IL一8及TNF一Q的含量，对比两组间的差异。结果抑肤酶组的肺组织含水量(73，65%士4.31%)较对照组(81.33%士3.67%)显著降低(P<0.05)。抑肤酶组肺组织中髓过氧化物酶活性(0.21士0.05△OD/min .9)显著(P<0.05)低于对照组(0.37士0.10△OD/min .9)。抑肤酶组丙二醛含量(0.17士0.oo4nmol/mgprot)显著(P<0.05)低于对照组(0.29士0.01 nmol/mgprot)。抑肤酶组一氧化氮含量(12.60士5.73pmol/gprot)显著(P<0.05)低于对照组(35.10士13.73 p mol/gprot)。病理切片观察显示缺血再灌注后的肺组织呈较为严重的白细胞浸润及肺水肿形成，而抑肤酶组的病变程度较对照组轻微。抑肤酶组血清IL~6含量在再灌注后1小时(46.69土3.86pg/ml)及两小时(61.03士2.10pg/ml)显著(P<0.05)低于对照组(66.18土1.54pg/ml、93.45士4.34pg/ml)。抑肤酶组血清TNF一a含量在恢复血流灌注后30分钟(1 3 .19士0 .9 3pg/ml)、1小时(14.56士1.93pg/ml)及两小时(13.64士3.78pg/ml)显著(P<0.05)低于对照组(分别为19.01士1.33pg/ml，23.16士1.llpg/ml及23.81士2.05pg/m1)。抑肤酶组血清IL一8含量在再灌注后30分钟15.30士l.37pg/ml、1小时(16.34士2.64pg/ml)及两小时(16.87士2.92pg/ml)显著(P<0.05)低于对照组(分别为 一3-第四军医大学硕士学位论文18.86士1.19pg/ml，22.45士1.55pg/ml及21.11士2.53pg/ml)。结论通过本研究，我们认为抑肤酶可以对肺移植中肺的缺血再灌注损伤起到保护作用。其作用可能的机制包括减少氧自由基的生成与释放，抑制中性粒细胞的聚集与激活，减轻肺组织的水肿。并且通过对相关炎性细胞因子IL一6、工L一8以及TNF一a表达的抑制作用，减轻缺血再灌注过程对肺组织造成的炎症损伤。